巴氯芬及γ-氨基丁酸與蛋白質(zhì)的相互作用研究.pdf

1、藥物與人類生活密不可分。研究藥物的療效、分布、代謝、毒副作用對(duì)于評(píng)價(jià)藥物、新藥研發(fā)等方面都有重要意義。巴氯芬是γ-氨基丁酸的脂溶性衍生物，屬于神經(jīng)遞質(zhì)類藥物。主要用于骨骼肌松馳，解痙攣及外傷等。Γ-氨基丁酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，可用于治療咳嗽和肺部過(guò)敏等癥狀。研究?jī)烧咚幮У奈恼路浅６?，但是?duì)于兩者在體內(nèi)的與其他蛋白質(zhì)的結(jié)合和毒副作用的文章非常少。針對(duì)這一問(wèn)題，本文以這兩種藥物為研究對(duì)象，運(yùn)用光譜等其他方法研究它們與蛋白質(zhì)的相

2、互作用。從更微觀層面研究?jī)煞N藥物與不同蛋白質(zhì)的作用，對(duì)于更深入的了解藥物的功效提供了一些數(shù)據(jù)。具體工作如下：
　　 1、用紫外—可見(jiàn)吸收光譜法與核磁共振法研究β-環(huán)糊精對(duì)巴氯芬的包結(jié)行為。用摩爾比法和直線擬合法確定了包結(jié)物的化學(xué)計(jì)量比為1：1。計(jì)算了主客體在不同溫度下的包結(jié)常數(shù)K，從而得到了包結(jié)過(guò)程的熱力學(xué)數(shù)據(jù)ΔH，ΔS。結(jié)果表明包結(jié)過(guò)程是自發(fā)的運(yùn)動(dòng)，主要驅(qū)動(dòng)力為疏水作用力。用熒光光譜研究了巴氯芬與包結(jié)物對(duì)牛血清白蛋白的相互作用

3、，結(jié)果表明，巴氯芬及包結(jié)物對(duì)BSA會(huì)產(chǎn)生靜態(tài)猝滅。其中巴氯芬與BSA的主要作用為疏水作用，而包結(jié)物對(duì)BSA的主要作用為靜電作用，這是由于β-環(huán)糊精將巴氯芬的疏水部分包結(jié)的結(jié)果。
　　 2、研究巴氯芬及γ-氨基丁酸與牛血清白蛋白的結(jié)合及金屬離子的影響。Γ-氨基丁酸能夠改變牛血清白蛋白π→π*躍遷的電子能級(jí)差，使牛血清白蛋白的紫外光譜發(fā)生藍(lán)移。兩者在32s左右就能較為穩(wěn)定的結(jié)合。通過(guò)紅外光譜法表征可得，巴氯芬和γ-氨基丁酸都能夠改變

4、牛血清白蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)。熒光光譜法和紫外光譜法研究表明：巴氯芬與牛血清白蛋白結(jié)合的結(jié)合不屬于非輻射共振能量轉(zhuǎn)移。探討了部分金屬離子對(duì)巴氯芬與牛血清白蛋白的結(jié)合的影響。結(jié)果表明，正常的金屬離子濃度是保證巴氯芬與牛血清白蛋白結(jié)合的必要條件。
　　 3、采用熒光光譜法和紫外可見(jiàn)吸收光譜法研究了巴氯芬與胃蛋白酶的結(jié)合。觀測(cè)到巴氯芬使胃蛋白酶的最大紫外吸收峰藍(lán)移。由Stern-Volmer方程求得其熒光猝滅類型為靜態(tài)猝滅，求出結(jié)合常數(shù)，由

5、熱力學(xué)參數(shù)判斷其作用力主要為疏水作用。根據(jù)非輻射能量轉(zhuǎn)移理論，胃蛋白酶與巴氯芬之間發(fā)生了能量轉(zhuǎn)移，從而使胃蛋白酶發(fā)生了熒光猝滅。用紅外光譜法研究了巴氯芬對(duì)胃蛋白酶的影響，結(jié)果表明，巴氯芬改變了胃蛋白酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)。利用胃蛋白酶的催化性質(zhì)研究巴氯芬對(duì)胃蛋白酶活性的影響，結(jié)果表明，巴氯芬抑制了胃蛋白酶46.50％的活性。
　　 4、研究了巴氯芬與細(xì)胞色素C間的結(jié)合。巴氯芬能夠使細(xì)胞色素C發(fā)生增色效應(yīng)。同步熒光法結(jié)果表明，巴氯芬會(huì)使細(xì)胞