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1、近年來,抗生素在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用越來越廣泛,由于盲目追求利益最大化和相關(guān)部門的監(jiān)管不力導(dǎo)致抗生素濫用現(xiàn)象嚴(yán)重??股氐臑E用不僅會(huì)誘導(dǎo)水產(chǎn)品和周圍環(huán)境中的耐藥細(xì)菌,而且很可能加速抗生素抗性基因在環(huán)境中以及水產(chǎn)品中的傳播擴(kuò)散。水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)是天津市的特色產(chǎn)業(yè),更是支柱產(chǎn)業(yè),本課題前期研究結(jié)果表明海河流域天津段表層水和沉積物中的抗生素污染比我國其他地區(qū)都嚴(yán)重,而造成這種污染的重要來源來自于養(yǎng)殖業(yè)。因此有必要針對(duì)天津市的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)行抗生素抗性研
2、究。
選取天津市郊區(qū)四個(gè)區(qū)分別為北辰區(qū)、西青區(qū)、東麗區(qū)和津南區(qū)的6個(gè)水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)為采樣點(diǎn),對(duì)其中的底泥和水的細(xì)菌進(jìn)行磺胺甲惡唑和四環(huán)素藥物的抗性研究。采用平板涂布法對(duì)磺胺甲惡唑和四環(huán)素的耐藥率分析不僅發(fā)現(xiàn)底泥中的耐藥細(xì)菌數(shù)量和耐藥率都要大大高于水中,而且磺胺的耐藥率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于四環(huán)素,如磺胺甲惡唑濃度為50,100,200μg/ml時(shí)底泥中細(xì)菌耐藥率范圍在1.04%~61.29%之間,四環(huán)素濃度為5,10,20μg/ml時(shí)細(xì)菌耐
3、藥率范圍在0.007%~0.320%之間,并且與國外的某些研究相比,底泥的磺胺耐藥率呈現(xiàn)較高的趨勢(shì)。
另外,采用16S rDNA方法對(duì)抗性平板上篩選出的耐藥菌進(jìn)行鑒定,結(jié)果表明兩種抗生素耐藥菌的優(yōu)勢(shì)菌都是芽孢桿菌屬,鑒定出的耐藥菌包括環(huán)境中常見的土著細(xì)菌如芽孢桿菌和短桿菌,以及腸球菌、糞產(chǎn)堿桿菌和不動(dòng)桿菌等條件致病菌,這表明腸道菌經(jīng)排泄進(jìn)入環(huán)境后很可能會(huì)與土著菌和條件致病菌發(fā)生抗性元件的水平轉(zhuǎn)移,造成抗性在環(huán)境中的擴(kuò)散,構(gòu)
4、成潛在的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。
采用普通PCR方法對(duì)細(xì)菌中的抗性基因進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)sul基因在磺胺耐藥菌中分布很普遍,是導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)磺胺產(chǎn)生耐藥性的主要遺傳機(jī)制;另外,細(xì)菌體內(nèi)的sul2基因比sul1基因的檢出頻率要高,這說明sul2比sul1的分布更為廣泛。利用熒光定量PCR方法對(duì)底泥中的六種抗性基因進(jìn)行定量后發(fā)現(xiàn)底泥中抗性基因的含量大小為sul2>sul1>tetW>tetO>tetM>tetT,底泥中的磺胺抗性基因的含量要明顯地多
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