異基因骨髓間充質(zhì)干細胞移植對膠原誘導關(guān)節(jié)炎大鼠血清多種細胞因子的影響.pdf

1、目的：
　　觀察BMSCs移植對膠原誘導關(guān)節(jié)炎（CIA）大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-17、RANKL、OPG、RANTES、MCP-1、IP-10、VEGF的影響，探討B(tài)MSCs免疫調(diào)節(jié)作用的機制。
　　方法：
　　1.體外分離、培養(yǎng)Wistar大鼠BMSCs，流式細胞術(shù)檢測表面抗原CD44、CD105、CD29、CD34、CD45、CD31；BMSCs分化為成骨細胞、脂肪細胞的鑒定。
　　2.實驗分組

2、：CIA早期對照組、CIA晚期對照組、BMSCs早期干預組、BMSCs晚期干預組、MTX干預組、空白對照組，每組8只。
　　3.給藥方法：按1×107/kg/鼠計算，將適量BMSCs注到大鼠體內(nèi)，MTX為按0.9mg/kg給藥，1次/周。
　　4.檢測指標：42d時，流式多因子檢測技術(shù)檢測外周血中TNF-α、IL-6、IL-17、RANKL、OPG、MCP-1、RANTES、IP-10、VEGF的表達水平，收集數(shù)據(jù)做統(tǒng)計分析

3、。
　　結(jié)果：
　　1.經(jīng)流式細胞術(shù)檢測：CD44、CD105、CD29陽性，CD45、CD34、CD31陰性。BMSCs誘導成骨、成脂分化能力強。按照間充質(zhì)干細胞國際標準，證實獲得的細胞為BMSCs。
　　2. CIA模型組大鼠血清中TNF-α、IL-6、RANKL、RANTES、MCP-1、IP-10、VEGF水平明顯較空白對照組升高，P<0.05；IL-17a、OPG在CIA模型組與空白對照組間比較差異無統(tǒng)計學意

4、，P>0.05。
　　3.與CIA模型組比較，MTX治療組大鼠血清中TNF-α、IL-6、RANKL、RANTES、MCP-1、IP-10水平明顯下降，P<0.05。MTX治療組VEGF下降不明顯，與CIA模型組比較P>0.05。
　　4.早期BMSCs治療組較早期CIA模型組TNF-α、IL-6明顯降低，P<0.05；晚期BMSCs治療組較晚期CIA模型組TNF-α、IL-6明顯下降，P<0.05；早期BMSCs治療組與M

5、TX治療組比較TNF-α、IL-6水平接近，差異無統(tǒng)計學意義P>0.05；晚期BMSCs治療組TNF-α、IL-6水平也有下降趨勢，但較MTX治療組下降不明顯， P>0.05。
　　5.早期BMSCs治療組較早期CIA模型組RANTES、IP-10明顯下降， P<0.05，但晚期BMSCs治療組與晚期CIA模型組比較RANTES、IP-10差別無統(tǒng)計學意義， P>0.05；早期BMSCs治療組較晚期BMSCs治療組RANTES、I

6、P-10下降更明顯， P>0.05；MTX治療組與早期BMSCs治療組、晚期BMSCs治療組的RANTES、IP-10均無統(tǒng)計學差別，P>0.05。
　　6.早期BMSCs治療組較早期CIA模型組MCP-1明顯下降，P<0.05，但晚期BMSCs治療組與CIA模型組比較RANTES差別無統(tǒng)計學意義，P>0.05；早期BMSCs治療組較晚期BMSCs治療組MCP-1下降更明顯，差別有統(tǒng)計學意義P<0.05；MTX治療組與早期BMSC

7、s治療組MCP-1水平無統(tǒng)計學差別P>0.05，晚期BMSCs治療組與MTX治療組比較MCP-1水平有統(tǒng)計學差異，P<0.05。
　　結(jié)論：
　　1.CIA大鼠中存在免疫功能紊亂，血清中TNF-α、IL-6、RANKL、RANTES、MCP-1、IP-10、VEGF水平明顯升高。
　　2. BMSCs可通過抑制血清中TNF-α、IL-6、RANTES、MCP-1、IP-10水平而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。
　　3.BMS