高表達(dá)Peroxiredoxin-2對DOCA-Salt高血壓小鼠心肌肥大和心功能不足的保護(hù)作用.pdf

1、目的： Peroxiredoxin-2（Prx-2）是一種新型過氧化物酶，本研究通過慢病毒轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)心臟 Prx-2高表達(dá)，并通過觀察 DOCA-Salt誘導(dǎo)高血壓小鼠的收縮壓、心肌肥大、Ⅰ和Ⅲ型膠原、心功能、細(xì)胞凋亡、活性氧等指標(biāo)在心臟中的變化，探討Prx-2對DOCA-Salt高血壓誘導(dǎo)的心臟重塑和心功能的影響，為Prx-2成為防治高血壓心臟病的新靶點提供實驗依據(jù)。
　　方法：隨機將8周大的雄性C57BL/6的小鼠劃為6組：對照

2、組（n=10）、對照+空載轉(zhuǎn)染組（n=9，空載病毒）對照+Prx-2轉(zhuǎn)染組（n=10，攜帶有目的基因慢病毒）、DOCA組（n=9）、DOCA+空載轉(zhuǎn)染組（n=10）、DOCA+Prx-2轉(zhuǎn)染組（n=12）。對照+空載轉(zhuǎn)染組、對照+Prx-2轉(zhuǎn)染組、DOCA+空載轉(zhuǎn)染組、DOCA+Prx-2轉(zhuǎn)染組的小鼠在制備DOCA-Salt模型前2周，將Peroxiredoxin-2的慢病毒或空載體的慢病毒用顯微注射的方法轉(zhuǎn)染至左心室壁組織。周后進(jìn)行D

3、OCA-Salt模型的制備，小鼠切除左腎，并在術(shù)后1周DOCA組、DOCA+空載轉(zhuǎn)染組及DOCA+Prx-2轉(zhuǎn)染組皮下注射DOCA，同時飲用1％NaCl和0.2%KCl；而對應(yīng)的對照組的小鼠自由則飲水進(jìn)食。鼠尾動脈袖套法測量收縮壓。12周末單壓力導(dǎo)管檢測左室壓力最大上升速率（dp/dtmax，代表著心肌收縮能力指標(biāo)）、左室壓力最大上升速率與心室內(nèi)壓比值（dp/dtmax/ip，代表著心肌收縮能力指標(biāo)）和左室壓力最大下降速率（dp/dtm

4、in，代表著心肌舒張能力指標(biāo)），及給予異丙腎上腺素前后 dp/dtmax、dp/dtmax/ip和dp/dtmin差值（?，心肌貯備能力指標(biāo)）；免疫熒光法檢測8-OHdG的表達(dá)（DNA過氧化產(chǎn)物）；免疫印記法檢測Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維蛋白、Prx-2蛋白、ASK1、p-ASK1、p38及 p-p38的表達(dá)；Tunel檢測心肌細(xì)胞凋亡情況；分光光度法檢測Caspase-3酶活性的高低。
　　結(jié)果：1、慢病毒轉(zhuǎn)染14天后，prx-2轉(zhuǎn)染組的

5、Peroxiredoxin-2蛋白表達(dá)水平較轉(zhuǎn)染對照明顯升高（P＜0.01）。2、與對照組比較，DOCA組的收縮壓、全心質(zhì)量指數(shù)、左心室質(zhì)量指數(shù)、I和III型膠原、8-OHdG、凋亡指數(shù)、p-p38及p-ASK1表達(dá)水平、Caspase-3酶活性均明顯增高（P＜0.05），而?dp/dtmax、?dp/dtmax/ip、?dp/dtmin無明顯變化；DOCA組和DOCA+空載轉(zhuǎn)染組的 SBP、全心質(zhì)量指數(shù)、左心室質(zhì)量指數(shù)、I和III型膠

6、原、8-OHdG、凋亡指數(shù)、p-p38及p-ASK1表達(dá)水平、Caspase-3酶活性差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）DOCA+空載轉(zhuǎn)染組比較，DOCA+Prx-2轉(zhuǎn)染組 SBP、全心質(zhì)量指數(shù)、左心室質(zhì)量指數(shù)的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但?dp/dtmax、?dp/dtmax/ip顯著增高，?dp/dtmin、I和III型膠原、8-OHdG、p-p38及 p-ASK1表達(dá)水平、Caspase-3酶活性及凋亡指數(shù)明顯下降（P＜0.

7、01）。3與對照組比較，假手術(shù)+Prx-2轉(zhuǎn)染組和DOCA組Peroxiredoxin-2的蛋白表達(dá)水平增高（P＜0.05）；DOCA組和DOCA+空載轉(zhuǎn)染組的 Peroxiredoxin-2的蛋白表達(dá)水平無明顯差異（P＞0.05）；較 DOCA+空載轉(zhuǎn)染組相比，DOCA+Prx-2轉(zhuǎn)染組的Peroxiredoxin-2蛋白增高（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1、Peroxiredoxin-2高表達(dá)對 DOCA-Salt誘導(dǎo)的血壓增