骨通貼膏抗炎鎮(zhèn)痛藥效作用機(jī)理及制劑安全性研究.pdf

1、目的:
　　通過骨通貼膏對大鼠刺激模型鎮(zhèn)痛、抗炎的影響，進(jìn)行鎮(zhèn)痛、抗炎的主要藥效學(xué)研究，觀察骨通貼膏鎮(zhèn)痛、抗炎作用并探索其作用機(jī)理，并通過骨通貼膏對皮膚刺激性試驗，研究其制劑安全性，為臨床用藥提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　實驗一:采用SD大鼠，通過甲醛法制備大鼠急性疼痛模型，評價骨通貼膏的鎮(zhèn)痛作用，并分別進(jìn)行大鼠(1)血漿β-內(nèi)啡肽含量測定;(2)血漿PGE2含量測定;(3)脊髓c-fos基因檢測;(4)血清、局部組

2、織NO含量測定;(5)血清、局部組織、腦脊髓P物質(zhì)含量測定。
　　實驗二:采用SD大鼠，通過胰蛋白酶法制備大鼠急性疼痛模型，評價骨通貼膏的鎮(zhèn)痛作用，并分別進(jìn)行大鼠(1)血漿β-內(nèi)啡肽含量測定;(2)血漿PGE2含量測定;(3)脊髓c-fos基因檢測;(4)血清、局部組織NO含量測定;(5)血清、局部組織、腦脊髓P物質(zhì)含量測定。
　　實驗三:采用SD大鼠，通過甲醛法制備大鼠急性炎癥模型，評價骨通貼膏的抗炎作用，并分別進(jìn)行大鼠(

3、1)炎癥組織TNF-α含量測定;(2)炎癥組織IL-1含量測定;(3)炎癥組織IL-6含量測定;(4)炎癥組織PGE2含量測定;(5)血清、炎癥組織NO含量測定;(6)血清、組織中5-HT含量測定;(7)血清、組織中HIS含量測定;(8)炎癥組織病理學(xué)觀察。
　　實驗四:采用SD大鼠，通過制備大鼠慢性肉芽腫炎癥模型，評價骨通貼膏的抗炎作用，并分別進(jìn)行大鼠(1)炎癥組織TNF-α含量測定;(2)炎癥組織IL-1含量測定;(3)炎癥組

4、織IL-6含量測定;(4)炎癥組織PGE2含量測定;(5)血清、炎癥組織NO含量測定;(6)血清、組織中5-HT含量測定;(7)血清、組織中HIS含量測定;(8)炎癥組織病理學(xué)觀察。
　　實驗五:取新西蘭兔采用同體自身左右側(cè)對比法單次給藥6h后，記錄皮膚刺激反應(yīng)，進(jìn)行單次給藥皮膚刺激性試驗，評價骨通貼膏制劑安全性。
　　實驗六:采用新西蘭兔，經(jīng)皮膚給予骨通貼膏24h連續(xù)21天，記錄皮膚刺激反應(yīng)，進(jìn)行多次給藥皮膚刺激性試驗，評

5、價骨通貼膏制劑安全性。
　　結(jié)果:
　　實驗一:在給藥后1h、2h、3h、4h、6h均能提高其痛閾值。骨通貼膏有效降低血漿中PGE2含量，升高血漿中β-內(nèi)啡肽含量，降低血清和致炎組織中NO含量，降低致炎組織和腦組織中P物質(zhì)含量，與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。但是對血清P物質(zhì)含量無明顯影響;對大鼠脊髓元c-fos基因表達(dá)亦無明顯影響(P＞0.05)。
　　實驗二:在給藥后1h、1.5h、24

6、h均能提高其痛閾值。骨通貼膏有效降低血漿中PGE2含量，提高血漿中β-內(nèi)啡肽含量，降低血清、炎癥組織中P物質(zhì)和NO含量、降低大腦組織P物質(zhì)的含量，與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。但是骨通貼膏對脊髓c-fos基因表達(dá)沒有明顯影響(P＞0.05)。
　　實驗三:在給藥后有抑制小鼠足跖腫脹的趨勢，但在給藥后1h、2h時沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，從給藥后3h開始骨通貼中、高劑量組與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差

7、異（P＜0.05或P＜0.01），給藥后4h、6h骨通貼低、中、高劑量組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05或P＜0.01）。骨通貼膏能降低血清和炎癥組織中NO和5-HT以及HIS的含量、降低炎癥組織中PGE2的含量、升高炎癥組織中IL-6的含量、影響炎癥組織病理改變（病理學(xué)評分顯著降低），骨通貼低、中、高劑量組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05或P＜0.01）。骨通貼膏能降低炎癥組織中TNF-α含量，但是不具有統(tǒng)計學(xué)

8、差異(P＞0.05)。骨通貼膏對炎癥組織中IL-1β的含量無明顯影響。
　　實驗四:骨通貼膏能有效抑制慢性炎癥，能減小肉芽腫組織重量、降低血清和炎癥組織中NO和5-HT以及HIS的含量、降低炎癥組織中PGE2和IL-1β的含量，骨通貼低、中、高劑量組與模型組相比較具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05或P＜0.01）。骨通貼膏對慢性炎癥組織病理改變無明顯影響，能降低TNF-α含量，但不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。骨通貼膏對炎癥組織中IL

9、-6的含量亦無明顯影響。
　　實驗五:骨通貼膏PIB劑型低、中劑量對完整皮膚和破損皮膚兔均無刺激性反應(yīng)。骨通貼膏PIB劑型高劑量對完整皮膚兔無刺激性反應(yīng)，破損皮膚兔除藥后1h有輕度刺激性。骨通貼膏傳統(tǒng)劑型完整皮膚和破損皮膚兔均有輕度刺激性反應(yīng)。
　　實驗六:骨通貼膏傳統(tǒng)劑型出現(xiàn)皮膚刺激反應(yīng)的時間點早于PIB劑型，且在同一時間段里，傳統(tǒng)劑型的刺激反應(yīng)程度大于PIB劑型。
　　結(jié)論:
　　(1)骨通貼膏對甲醛致痛大鼠

10、和胰蛋白酶致痛大鼠均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其作用機(jī)制可能是通過降低血血漿中PGE2含量，升高血漿中β-內(nèi)啡肽含量;降低血清和致炎組織中NO含量，降低致炎組織和腦組織中P物質(zhì)含量。
　　(2)骨通貼膏對甲醛致炎大鼠模型大鼠具有較好的抗炎作用，其作用機(jī)理可能是降低血清和炎癥組織中的NO、5-HT、HIS的含量;降低炎癥組織中PGE2的含量，升高組織中IL-6的含量，改善局部炎癥組織的皮下水腫和炎癥細(xì)胞浸潤。
　　(3)骨通貼膏對大