化學(xué)發(fā)光在藥物及生物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、化學(xué)發(fā)光分析法具有儀器設(shè)備簡單、易于實(shí)現(xiàn)自動化等顯著優(yōu)點(diǎn),成功應(yīng)用于化學(xué)及生物分析領(lǐng)域,與其他技術(shù)的聯(lián)用進(jìn)一步促進(jìn)了化學(xué)發(fā)光技術(shù)的快速發(fā)展,拓展了其應(yīng)用領(lǐng)域。本文首先將化學(xué)發(fā)光技術(shù)應(yīng)用于傳統(tǒng)藥物分析中,針對只溶于酸性介質(zhì)的藥物建立了堿性條件下測定的新方法。在以上工作的基礎(chǔ)上,將化學(xué)發(fā)光技術(shù)與納米技術(shù)相結(jié)合,建立了超靈敏的免疫分析方法,構(gòu)建了幾種新型化學(xué)發(fā)光傳感器。本論文的具體內(nèi)容包括以下幾部分:
　　 1、本章對化學(xué)發(fā)光分析法及

2、其在藥物分析中的應(yīng)用,以及化學(xué)發(fā)光分析法與納米技術(shù)聯(lián)用的現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述。首先介紹了化學(xué)發(fā)光分析法的發(fā)展、概念、原理以及基本裝置；詳細(xì)介紹了化學(xué)發(fā)光分析法的原理及在藥物分析中的應(yīng)用；綜述了納米材料在化學(xué)發(fā)光分析領(lǐng)域中的應(yīng)用。在以上基礎(chǔ)上,提出和開展了本論文的主要研究內(nèi)容。
　　 2、甲氧氯普胺只能溶于酸性介質(zhì)中,使得堿性條件下用流動注射對其進(jìn)行化學(xué)發(fā)光定量檢測存在一定的困難。本文在酸性介質(zhì)和高溫條件下,以K2Cr2O7為氧化劑氧化

3、甲氧氯普胺(metoclopramide,MCPM),而K2Cr2O7被還原為Cr(Ⅲ),利用Cr(Ⅲ)對luminol-H2O2體系的發(fā)光增強(qiáng)作用,結(jié)合流動注射技術(shù),建立了在堿性條件下測定MCPM的化學(xué)發(fā)光新方法。結(jié)果表明,該方法對MCPM測定的線性范圍為1.0×10-8-1.5×10-5g／mL,檢出限為8.0×10-9g／mL,對8.0×10-6g／mL的MCPM連續(xù)8次測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.9％。該方法靈敏度較高、操作簡便,可

4、成功應(yīng)用于藥片中MCPM含量的測定,為只溶于酸性介質(zhì)的MCPM等藥物在堿性條件下進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測奠定了良好的基礎(chǔ)。
　　 3、本章采用Fe3O4納米材料固定一抗,Au NPs@C納米復(fù)合材料固定二抗和辣根過氧化物酶,并采用夾心免疫模式,以雙螺旋管和盤管為反應(yīng)器和分離器,實(shí)現(xiàn)了對人體免疫球蛋白IgG的超靈敏快速定量檢測。Au NPs優(yōu)良的生物相容性為AuNPs@C納米復(fù)合材料有效地保持蛋白質(zhì)的活性奠定了基礎(chǔ)；同時,Au NPs@C

5、納米復(fù)合材料的大比表面積為二抗及酶的高密度負(fù)載提供了良好平臺,使化學(xué)發(fā)光信號大大增強(qiáng),提高了對目標(biāo)分子檢測的靈敏度。此外,利用Fe3O4納米粒子的磁性質(zhì)實(shí)現(xiàn)了分析檢測過程的自動化,以螺旋管為反應(yīng)器有效促進(jìn)了免疫反應(yīng)的快速進(jìn)行,并且盤管分離器的使用實(shí)現(xiàn)了磁性納米粒子夾心免疫結(jié)合物與未結(jié)合二抗復(fù)合物的完全分離。本方法對人體免疫球蛋白IgG免疫分析檢測在10 min內(nèi)即可完成,檢測的線性范圍為1.0L-1000 ng／mL,檢測限為0.74

6、ng／mL。該分析方法快速、實(shí)用,可以廣泛用于其他蛋白質(zhì)和DNA的檢測。
　　 4、提出一種制備石墨烯／魯米諾納米復(fù)合物的新方法,用殼聚糖將該復(fù)合物固定在玻璃管中,構(gòu)建了一種新型的化學(xué)發(fā)光傳感器。本文中考察了常溫混合、高溫混合、常溫加EDC／NHS混合三種不同的石墨烯／魯米諾納米復(fù)合物制備方法對傳感器性能的影響,結(jié)果表明,常溫下通過EDC／NHS將魯米諾和石墨烯交聯(lián)的方法制備的納米復(fù)合物對魯米諾分子的固載量最大,對H2O2的響應(yīng)

7、最強(qiáng)?？疾炝藲ぞ厶呛腿苣z-凝膠對石墨烯／魯米諾納米復(fù)合物的固定化對傳感器性能的影響,結(jié)果表明,殼聚糖能夠更好地保持復(fù)合材料的化學(xué)發(fā)光活性,石墨烯／魯米諾／殼聚糖膜傳感器對H202的檢測線性范圍寬,在5.0×10-6-2.0×10-4 mol／L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,檢測限為2.7×10-6 mol／L,且連續(xù)17次注射5.0×10-5mol／L H2O2的標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6％。本方法為生物化學(xué)發(fā)光傳感器的制備開辟了新途徑,具有良好的應(yīng)用