毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光在線聯(lián)用技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用.pdf

1、通過現(xiàn)代分析手段，了解藥物在體內(nèi)的變化，對藥物及其代謝物進(jìn)行研究，獲得藥物代謝動力學(xué)的各種參數(shù)和轉(zhuǎn)變、代謝的方式、途徑等信息，有助于在生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)、臨床等各個(gè)方面對所研究的藥物的質(zhì)量做出估計(jì)與評價(jià)，以及對藥物的改進(jìn)和開發(fā)做出貢獻(xiàn)。隨著藥物分析新技術(shù)、新儀器的不斷問世，體內(nèi)藥物的分析變得比以前要容易。發(fā)展并改進(jìn)用于體內(nèi)藥物分析的方法，可以為藥物的分析和質(zhì)量控制、臨床合理用藥及新藥的開發(fā)提供有力的工具。 毛細(xì)管電泳用于體內(nèi)藥物分析時(shí)的

2、優(yōu)點(diǎn)是分離效率高，樣品需要量少，對樣品的預(yù)處理要求簡單，應(yīng)用范圍廣，能用于分離多種化合物如藥物、氨基酸、肽和蛋白質(zhì)、低聚核苷酸甚至整個(gè)細(xì)胞。但由于毛細(xì)管的內(nèi)徑通常只有100 μm左右，采用光譜檢測方法時(shí)，檢測光程較短，使得毛細(xì)管電泳的檢測靈敏度不如常規(guī)的分析方法液相色譜，在實(shí)際的應(yīng)用中受到限制。本文以毛細(xì)管電泳與化學(xué)發(fā)光在線聯(lián)用的方法為基礎(chǔ)，在實(shí)驗(yàn)室自制了一臺聯(lián)用化學(xué)發(fā)光檢測的毛細(xì)管電泳裝置，結(jié)合毛細(xì)管電泳分離效率高和化學(xué)發(fā)光檢測靈敏度

3、高的優(yōu)點(diǎn)，用于體內(nèi)低濃度藥物的分析檢測的應(yīng)用中證明。該方法的選擇性強(qiáng)，采用合適的化學(xué)發(fā)光檢測體系，生物樣品內(nèi)的藥物能獲得靈敏的檢測，同時(shí)可避免不在該化學(xué)發(fā)光體系中產(chǎn)生發(fā)光信號的物質(zhì)的干擾。 本文首先對毛細(xì)管電泳和化學(xué)發(fā)光分析的基本理論進(jìn)行了介紹，重點(diǎn)綜述了毛細(xì)管電泳和化學(xué)發(fā)光聯(lián)用的接口方式和二者聯(lián)用在藥物分析中應(yīng)用的研究現(xiàn)狀。然后將毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光在線聯(lián)用的方法用于藥物制劑以及藥物在實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)的代謝物的分析。文章的主要研究

4、內(nèi)容如下： 1. 毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光聯(lián)用儀器的構(gòu)建以及儀器性能的改進(jìn)。建立了毛細(xì)管電泳與化學(xué)發(fā)光檢測在線聯(lián)用的儀器，對自組裝儀器的性能進(jìn)行考察并作了改進(jìn)。并采用這臺儀器對兩種喹諾酮類藥物加替沙星和甲磺酸帕珠沙星進(jìn)行了分析。利用沙星類藥物在luminol-H2O2發(fā)光體系中有較強(qiáng)的抑制作用，對這兩種物質(zhì)進(jìn)行了檢測，并分別對這兩種藥物制劑中有效成分的含量進(jìn)行了測定。 2. 將本方法用于中藥材苦參中的有效成分氧化苦參堿和中西

5、藥復(fù)方珍菊降壓片中有效成分蘆丁的分析。采用luminol-H2O2-KMnO4發(fā)光體系，氧化苦參堿在該體系中產(chǎn)生較強(qiáng)的抑制信號。通過考察毛細(xì)管電泳分離條件和發(fā)光條件，最終實(shí)現(xiàn)了中藥苦參提取液中氧化苦參堿的分離并對其含量進(jìn)行了測定。利用蘆丁在luminol-H2O2-NaClO發(fā)光體系中有較強(qiáng)的抑制作用，對其進(jìn)行了分析?？疾烀?xì)管電泳分離條件和發(fā)光條件，實(shí)現(xiàn)了珍菊降壓片提取液中蘆丁的分離和靈敏檢測。 3. 將本方法用于消炎藥貝諾酯

6、在家兔體內(nèi)的活性代謝物撲熱息痛的分析。最終，實(shí)現(xiàn)了兔血中低濃度的貝諾酯的代謝物撲熱息痛的靈敏檢測。對家兔灌胃貝諾酯后，體內(nèi)撲熱息痛的濃度隨時(shí)間的變化進(jìn)行了監(jiān)測，同時(shí)排除了體內(nèi)其余不產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號的物質(zhì)的干擾。 本方法還可以做進(jìn)一步的改進(jìn)，使其能應(yīng)用到更復(fù)雜的藥物代謝物的分析中。一方面解決體內(nèi)藥物濃度的，常用的紫外檢測方法靈敏度低的問題；另一方面對生物樣品的預(yù)處理要求也比較簡單，由于化學(xué)發(fā)光的選擇性，可以避免內(nèi)源性物質(zhì)對目標(biāo)分析