毛細管電泳-化學(xué)發(fā)光在線聯(lián)用技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用.pdf

1、通過現(xiàn)代分析手段，了解藥物在體內(nèi)的變化，對藥物及其代謝物進行研究，獲得藥物代謝動力學(xué)的各種參數(shù)和轉(zhuǎn)變、代謝的方式、途徑等信息，有助于在生產(chǎn)、實驗、臨床等各個方面對所研究的藥物的質(zhì)量做出估計與評價，以及對藥物的改進和開發(fā)做出貢獻。隨著藥物分析新技術(shù)、新儀器的不斷問世，體內(nèi)藥物的分析變得比以前要容易。發(fā)展并改進用于體內(nèi)藥物分析的方法，可以為藥物的分析和質(zhì)量控制、臨床合理用藥及新藥的開發(fā)提供有力的工具。 毛細管電泳用于體內(nèi)藥物分析時的

2、優(yōu)點是分離效率高，樣品需要量少，對樣品的預(yù)處理要求簡單，應(yīng)用范圍廣，能用于分離多種化合物如藥物、氨基酸、肽和蛋白質(zhì)、低聚核苷酸甚至整個細胞。但由于毛細管的內(nèi)徑通常只有100 μm左右，采用光譜檢測方法時，檢測光程較短，使得毛細管電泳的檢測靈敏度不如常規(guī)的分析方法液相色譜，在實際的應(yīng)用中受到限制。本文以毛細管電泳與化學(xué)發(fā)光在線聯(lián)用的方法為基礎(chǔ)，在實驗室自制了一臺聯(lián)用化學(xué)發(fā)光檢測的毛細管電泳裝置，結(jié)合毛細管電泳分離效率高和化學(xué)發(fā)光檢測靈敏度

3、高的優(yōu)點，用于體內(nèi)低濃度藥物的分析檢測的應(yīng)用中證明。該方法的選擇性強，采用合適的化學(xué)發(fā)光檢測體系，生物樣品內(nèi)的藥物能獲得靈敏的檢測，同時可避免不在該化學(xué)發(fā)光體系中產(chǎn)生發(fā)光信號的物質(zhì)的干擾。 本文首先對毛細管電泳和化學(xué)發(fā)光分析的基本理論進行了介紹，重點綜述了毛細管電泳和化學(xué)發(fā)光聯(lián)用的接口方式和二者聯(lián)用在藥物分析中應(yīng)用的研究現(xiàn)狀。然后將毛細管電泳-化學(xué)發(fā)光在線聯(lián)用的方法用于藥物制劑以及藥物在實驗動物體內(nèi)的代謝物的分析。文章的主要研究

4、內(nèi)容如下： 1. 毛細管電泳-化學(xué)發(fā)光聯(lián)用儀器的構(gòu)建以及儀器性能的改進。建立了毛細管電泳與化學(xué)發(fā)光檢測在線聯(lián)用的儀器，對自組裝儀器的性能進行考察并作了改進。并采用這臺儀器對兩種喹諾酮類藥物加替沙星和甲磺酸帕珠沙星進行了分析。利用沙星類藥物在luminol-H2O2發(fā)光體系中有較強的抑制作用，對這兩種物質(zhì)進行了檢測，并分別對這兩種藥物制劑中有效成分的含量進行了測定。 2. 將本方法用于中藥材苦參中的有效成分氧化苦參堿和中西

5、藥復(fù)方珍菊降壓片中有效成分蘆丁的分析。采用luminol-H2O2-KMnO4發(fā)光體系，氧化苦參堿在該體系中產(chǎn)生較強的抑制信號。通過考察毛細管電泳分離條件和發(fā)光條件，最終實現(xiàn)了中藥苦參提取液中氧化苦參堿的分離并對其含量進行了測定。利用蘆丁在luminol-H2O2-NaClO發(fā)光體系中有較強的抑制作用，對其進行了分析。考察毛細管電泳分離條件和發(fā)光條件，實現(xiàn)了珍菊降壓片提取液中蘆丁的分離和靈敏檢測。 3. 將本方法用于消炎藥貝諾酯

6、在家兔體內(nèi)的活性代謝物撲熱息痛的分析。最終，實現(xiàn)了兔血中低濃度的貝諾酯的代謝物撲熱息痛的靈敏檢測。對家兔灌胃貝諾酯后，體內(nèi)撲熱息痛的濃度隨時間的變化進行了監(jiān)測，同時排除了體內(nèi)其余不產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號的物質(zhì)的干擾。 本方法還可以做進一步的改進，使其能應(yīng)用到更復(fù)雜的藥物代謝物的分析中。一方面解決體內(nèi)藥物濃度的，常用的紫外檢測方法靈敏度低的問題；另一方面對生物樣品的預(yù)處理要求也比較簡單，由于化學(xué)發(fā)光的選擇性，可以避免內(nèi)源性物質(zhì)對目標(biāo)分析