金黃色葡萄球菌腸毒B在變應性鼻炎發(fā)病機制中作用的實驗研究.pdf

1、目的:變應性鼻炎(AR)是常見的耳鼻咽喉科疾病,也是常見的呼吸道變應性疾病。變應性鼻炎在全球范圍內(nèi)的患病率為10-25％,而在我國西部的部分地區(qū)其患病率高達34.31%,是嚴重危害人類健康和生活質(zhì)量的常見疾病。以變應性鼻炎為代表的變應性疾病的發(fā)病機制研究一直都是國內(nèi)外專家關注的熱點。一般經(jīng)典的認識是,變應原橋聯(lián)IgE,介導肥大細胞脫顆粒釋放炎性介質(zhì),引起不同程度的鼻黏膜炎癥,即I型超敏反應是變應性鼻炎發(fā)病的主要機制。但臨床上發(fā)現(xiàn),血清中

2、特異性IgE水平與癥狀嚴重程度并非完全相關,可能存在非經(jīng)典途徑。近年來,細菌超抗原學說越來越得到廣大學者的重視?，F(xiàn)有研究證實,細菌超抗原影響免疫調(diào)節(jié)細胞(T淋巴細胞)和促炎細胞(樹突狀細胞、嗜酸性粒細胞、上皮細胞等)的活性,誘導或促進變態(tài)反應性疾病的發(fā)生和發(fā)展。
　　 金黃色葡萄球菌腸毒素B(SEB)是由金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的一種超抗原,能直接連接抗原提呈細胞的MHCⅡ類分子外側(cè)和T細胞受體Vβ區(qū),同時非特異性激活體內(nèi)將近30%的

3、T細胞,而普通抗原僅能激活0.01%的T細胞。通過SEB超抗原的這種槽外連接,有利于被MHC呈遞的抗原肽更有效的與T細胞可變區(qū)結合,增強了變應原的抗原性,促進變態(tài)反應性炎癥的發(fā)生、發(fā)展。另外,SEB可以作為變應原活化特異性T細胞,繼而誘導抗原特異性IgE產(chǎn)生,發(fā)生經(jīng)典的變態(tài)反應。金黃色葡萄球菌及其分泌的超抗原廣泛分布人類的皮膚和鼻腔,人們在日常生活中接觸金葡菌超抗原的頻率極高,這就增加了特應性個體罹患變態(tài)反應性疾病的風險。但尚無確切證據(jù)

4、說明SEB可作為變應原誘導變應性鼻炎的發(fā)生。
　　 本研究應用SEB反復鼻腔噴滴,觀察豚鼠打噴嚏、抓鼻等變應性鼻炎典型癥狀,鼻黏膜中嗜酸性粒細胞的浸潤情況,及血清SEB特異性IgE和IgG1的表達,從而證明SEB作為變應原,能夠誘導變應性鼻炎的發(fā)生。
　　 方法:將20只健康Hartley系豚鼠隨機分為2組:模型組和對照組,每組10只。模型組鼻腔噴滴SEB,每天1次,連續(xù)14天。每次噴滴前,用4%利多卡因(每側(cè)鼻孔20μ

5、1)先噴滴鼻腔,以抑制鼻腔纖毛運動,延長變應原在鼻腔停留時間。間隔7天后,以同樣劑量SEB噴滴鼻腔激發(fā),每周激發(fā)2次,連續(xù)激發(fā)3周。激發(fā)前,不再鼻腔應用利多卡因。對照組以生理鹽水代替SEB進行實驗。在激發(fā)階段,對其噴嚏和抓鼻做動態(tài)癥狀學觀察;間接ELISA法檢測血清SEB特異性IgE、IgG1和IgG2水平;HE染色觀察鼻腔組織的病理改變。
　　 結果:
　　 (1)模型組豚鼠出現(xiàn)典型的變應性鼻炎癥狀,如頻繁噴嚏和抓鼻;

6、模型組豚鼠血清SEB特異性IgE和IgG1滴度明顯升高;模型組豚鼠的鼻腔黏膜出現(xiàn)以嗜酸性粒細胞為主的炎癥細胞浸潤,黏膜下間質(zhì)明顯水腫,小血管擴張。
　　 (2)對照組豚鼠未出現(xiàn)變應性鼻炎的典型癥狀,血清中無可檢測水平的SEB特異性IgE和IgG1,鼻黏膜未見明顯改變。
　　 (3)與對照組比較,模型組豚鼠鼻黏膜相關淋巴組織中IL-23mRNA表達下調(diào),鼻腔灌洗液中IL-17水平降低。
　　 結論:
　　

7、(1)采用反復鼻腔噴滴SEB的方法誘導出鼻腔黏膜變應性炎癥,驗證了SEB可以作為傳統(tǒng)的變應原誘導變應性鼻炎的發(fā)生。
　　 (2)采用反復鼻腔噴滴SEB致敏,鼻腔連續(xù)激發(fā)的方法誘導出鼻腔變應性炎癥,從而成功地建立了具有雙相反應的變應性鼻炎動物模型,為進一步研究伴有金葡菌鼻腔攜帶的變應性鼻炎的發(fā)病機制和遲發(fā)相反應奠定了基礎。
　　 (3)模型組豚鼠Th17型細胞因子IL-23、IL-17的表達降低,而Th2細胞因子IL-4的