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1、目的:觀察紫蛇膏在體外對(duì)金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)及產(chǎn)生超抗原的影響。
方法:選擇分離自臨床AD患者皮損處產(chǎn)生A型腸毒素(SEA)、B型腸毒素(SEB)的金黃色葡萄球菌臨床株(包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌MSSA)及標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC29213,用藥敏紙片法測(cè)試金黃色葡萄球菌對(duì)紫蛇膏的敏感性;以微量肉湯液基稀釋法測(cè)定紫蛇膏對(duì)金葡菌的最低抑菌濃度(MIC);應(yīng)用分光光度計(jì)法測(cè)0-24小時(shí)培養(yǎng)物的OD值,
2、繪制細(xì)菌24小時(shí)的時(shí)間-生長(zhǎng)曲線;雙抗體夾心酶聯(lián)免疫分析(ELISA)測(cè)定紫蛇膏干預(yù)前后金黃色葡萄球菌產(chǎn)生超抗原SEA、SEB的水平。
結(jié)果:1g/ml的紫蛇膏對(duì)ATCC29213、MSSA及MRSA的抑菌圈分別為19.33mm、18.75mm、18.79mm,其抑菌圈與濃度為128μg/ml的莫匹羅星相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。紫蛇膏對(duì)ATCC29213、MSSA、MRSA的MIC分別為1.54mg/ml、1.68mg/
3、ml、1.54 mg/ml,三者的MIC無(wú)顯著性差異,P>0.05。濃度為1.68 mg/ml(即MIC)的紫蛇膏可抑制金黃色葡萄球菌生長(zhǎng):與0h比較,紫蛇膏干預(yù)的3株金葡菌在0-12h內(nèi)OD值無(wú)明顯變化(P>0.05),細(xì)菌潛伏期比空白組(<4h)明顯延長(zhǎng);14h時(shí)細(xì)菌數(shù)量才開(kāi)始緩慢增加(與0h相比,P<0.05),進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,至22h時(shí)與24h相比無(wú)明顯差異(P>0.05),進(jìn)入穩(wěn)定期。紫蛇膏組在對(duì)數(shù)期的細(xì)菌濃度明顯低于同時(shí)期空
4、白對(duì)照組(P<0.05);至24h紫蛇膏組OD值與空白組相比有顯著性差異(P<0.05),濃度明顯低于空白組;與莫匹羅星組相比兩者無(wú)明顯差異(P>0.05)。紫蛇膏濃度在0.105mg/ml-3.36mg/ml范圍內(nèi)時(shí),呈濃度依賴性地降低ATCC29213、MSSA、MRSA分泌的SEA、SEB水平。與對(duì)照組相比,紫蛇膏濃度為1/32MIC(即0.0525mg/ml)時(shí)三株金葡菌分泌S EB明顯減少(P<0.05),紫蛇膏濃度為0.10
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