MiR-126在端粒功能障礙小鼠造血干細胞功能上的研究.pdf

1、本文對MiR-126在端粒功能障礙小鼠造血干細胞功能上進行了研究。microRNA是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性并且具有調(diào)控功能的非編碼RNA，很多文獻報道m(xù)icroRNA信號通路參與造血干細胞（HSC）的穩(wěn)態(tài)維持和再生。但在端粒功能障礙小鼠模型中針對miRNA調(diào)控途徑還沒有相關(guān)的研究工作，利用已有的兩種基因缺陷小鼠模型（miR-126條件敲除小鼠模型和端粒功能障礙小鼠模型）研究miR-126對HSC穩(wěn)態(tài)維持和衰老的影響；并進一步確定miR

2、-126在HSC中的靶基因。對于闡明miR-126參與 HSC衰老的分子機制有重要的科學意義。實驗結(jié)果顯示正常生理狀態(tài)下miR-126條件敲除小鼠骨髓中的造血干細胞數(shù)目增多，髓系粒系祖細胞數(shù)目增多，脾臟變大，脾臟中造血干細胞（LSK）比例增加，進一步染色檢測脾臟中髓系粒細胞比例增加。為了研究骨髓中造血干細胞數(shù)目增多的原因，對miR-126基因條件敲除小鼠造血干細胞細胞周期進行了分析，miR-126基因條件敲除小鼠造血干細胞G0期比例降低

3、，而G1，S/G2/M比例升高。 Brdu實驗結(jié)果顯示：miR-126基因條件敲除小鼠與對照小鼠相比Brdu+比例升高。對小鼠全骨髓細胞中造血干細胞進行了凋亡的檢測發(fā)現(xiàn)miR-126基因條件敲除小鼠的造血干細胞較對照凋亡細胞比例沒有差異。證明骨髓中造血干細胞增多是由于G0期細胞減少的原因和細胞凋亡無關(guān)。Q-PCR檢測WT和G3小鼠造血干細胞（LSK）中miR-126表達情況，發(fā)現(xiàn)G3小鼠造血干細胞中miR-126表達和WT相比出現(xiàn)明顯下