殼寡糖降低體內外非酒精性脂肪肝模型甘油三脂的作用及機制研究.pdf

1、目的：研究殼寡糖（COS）對體內外非酒精性脂肪模型甘油三酯（TG）的影響及作用機制。
　　方法：在體外將1mmol/L混合脂肪酸處理的LO2細胞作為脂肪變模型組；1mmol/L混合脂肪酸及0.5mg/mL COS共同處理的細胞為COS組，同時以未處理的細胞為對照組，24 h后進行油紅O染色，測細胞內甘油三酯含量。用反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)及Western blot檢測各實驗組細胞固醇調節(jié)元件結合蛋白1c（SREBP-1

2、c）、脂肪酸合成酶（FAS）和肉毒堿棕櫚酰基轉移酶1A（CPT1A）的mRNA以及蛋白表達情況。2mmol/L的脂肪酸誘導細胞凋亡，用Hoechst染色檢測COS對細胞凋亡的保護作用。在體內將雄性C57BL/6J小鼠按體重隨機分為對照組、高脂組和COS組，分別給予不同的飼料喂養(yǎng)，16周后取小鼠肝臟分別進行HE及油紅O染色，同時測定肝臟TG含量。采用SPSS17.0軟件單因素方差分析進行多組數據間的比較，進一步用SNK法進行多組的兩兩間比

3、較。
　　結果：(1)相較于對照組，模型組LO2肝細胞出現脂肪變性，細胞內脂滴增多，TG含量升高。COS處理后可以降低細胞內TG的含量。(2)模型組SREBP-1c、FAS mRNA的表達明顯升高(2.306±0.239對比1.010±0.174，P<0.05；1.788±0.192對比1.006±0.139，P<0.05)，而CPT1A mRNA的水平略高（1.355±0.145對比1.010±0.176，P>0.05），但差異

4、無統(tǒng)計學意義。經COS處理后，SREBP-1c、FAS mRNA相對表達量（1.039±0.107、1.212±0.180，P<0.05）降低，CPT1A mRNA表達水平升高(1.911±0.773，P<0.05)，差別有統(tǒng)計學意義。(3)模型組SREBP-1c及 FAS蛋白表達和對照組、COS組相比最高(0.351±0.016對比0.206±0.012、0.161±0.081，P<0.05；1.238±0.051對比0.287±0.

5、031、0.332±0.023，P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義。COS組CPT1A蛋白的相對表達量（1.014±0.033）高于對照組和模型組（0.547±0.075、0.561±0.046，P<0.05）。(4) COS可以保護脂肪酸誘導的細胞凋亡。(5) COS能減輕高脂飲食小鼠肝臟內的脂質堆積，降低TG含量。
　　結論：COS能減輕體內外NAFLD模型肝細胞內TG蓄積，其可能機制與抑制SREBP-1c及其下游的FAS基因表