兩種鋅源對奶山羊鋅轉運蛋白基因SLC39A1-3表達的影響.pdf

1、為了研究日糧中分別添加兩種不同的鋅源后對奶山羊鋅轉運蛋白表達的影響,本試驗隨機挑選9只2.5～3歲健康且體況相似的關中奶山羊,并隨機分為硫酸鋅(ZnSO4)組、氨基酸鋅(Zn-AA)組和對照組。分別飼喂Zn濃度為60mg/kg的ZnSO4日糧和Zn-AA日糧,以及無添加鋅日糧,并同時給予Zn濃度為60mg/kg的ZnSO4水和Zn-AA水,以及去離子水。飼料和飲用水均任動物自由采食。一周后屠宰取組織樣品,液氮中保存。此后將人、小鼠、牛和

2、綿羊ZIP鋅轉運蛋白Ⅱ亞家族的ZIP1～3等3個鋅轉運蛋白的基因SLC39A1～3的序列對山羊的ESTs和UniGene進行搜索,拼接后設計引物通過反轉錄PCR(RT-PCR)對奶山羊的這3個基因進行克隆,并對其在奶山羊23種組織中的分布進行檢測,再通過熒光定量PCR對飼喂兩種不同鋅源后這3種基因在奶山羊的真胃、十二指腸近段、中段、遠段、空腸、回腸、肝臟和腎臟等8種鋅主要消化吸收部位中的表達情況進行初探。主要結果如下:
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3、、奶山羊鋅轉運蛋白基因SLC39A1的克隆與組織分布
　　 克隆的奶山羊SLC39A1基因包含一個完整的開放閱讀框架(open reading frame,ORF),長度為972bp,編碼由324個氨基酸殘基組成的ZIP1蛋白,其中酸性氨基酸為42個,堿性氨基酸為24個,分子量為34.18 kDa,等電點為5.567。該基因在真胃、十二指腸近段、十二指腸中段、十二指腸遠端、空腸、回腸、肝臟、腎臟、脾臟、肺臟、胰臟、肌肉、大腦、瘤

4、胃、網(wǎng)胃、瓣胃、直腸、結腸、盲腸、皮膚和乳腺21種組織中有分布。
　　 2、奶山羊鋅轉運蛋白基因SLC39A2的克隆與組織分布
　　 克隆的奶山羊SLC39A2基因包含一個完整的ORF,長度為927bp,編碼由309個氨基酸殘基組成的ZIP2蛋白,其中酸性氨基酸為39個,堿性氨基酸為23個,分子量為32.79 kDa,等電點為5.07。該基因在真胃、十二指腸近段、十二指腸遠端、空腸、回腸、肝臟、脾臟、肺臟、胰臟、肌肉、大

5、腦、瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、直腸、結腸、盲腸、皮膚、睪丸和乳腺20種組織中有分布。
　　 3、奶山羊鋅轉運蛋白基因SLC39A3的克隆與組織分布
　　 克隆的奶山羊SLC39A3基因包含一個完整的ORF,長度為942bp,編碼由314個氨基酸殘基組成的ZIP3蛋白,其中酸性氨基酸為39個,堿性氨基酸為31個,分子量為33.97 kDa,等電點為5.854。該基因在真胃、十二指腸近段、十二指腸中段、十二指腸遠端、空腸、同腸、肝臟

6、、脾臟、肺臟、胰臟、肌肉、大腦、瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、直腸、結腸、盲腸、皮膚、睪丸和乳腺21種組織中有分布。
　　 4、SLC39A1 mRNA在不同鋅處理組中的表達變化
　　 在十二指腸遠段中ZnSO4組奶山羊的SLC39A1 mRNA的表達量顯著升高,Zn-AA組也有所升高,但差異不顯著；在十二指腸中段中兩個試驗組的奶山羊SLC39A1 mRNA的表達量均有所下降,差異不顯著；而在其余組織中兩個加鋅試驗組奶山羊SLC39

7、A1 mRNA表達量均有所升高,差異也不顯著。
　　 5、SLC39A2 mRNA在不同鋅處理組中的表達變化
　　 在真胃中Zn-AA組奶山羊的SLC39A2 mRNA的表達量顯著降低,而ZnSO4組較對照組略有升高,但差異不顯著；在十二指腸中段中ZnSO4組的奶山羊SLC39A2 mRNA的表達量顯著升高,Zn-AA組有所升高,差異不顯著；在回腸中,ZnSO4組SLC39A2 mRNA表達量有所升高,差異不顯著,Zn-

8、AA組有所降低,差異也不顯著,但是兩個加鋅試驗組間差異顯著；在肝臟中,ZnSO4組顯著降低,Zn-AA組顯著升高,兩個加鋅試驗組間差異也顯著；在十二指腸近段中,兩個加鋅試驗組均有所降低,但是差異均不顯著；而在其余組織中試驗組間SLC39A2 mRNA表達量基本沒有變化。
　　 6、SLC39A3mRNA在不同鋅處理組中的表達變化
　　 在十二指腸近段中兩個加鋅試驗組SLC39A3 mRNA表達量均顯著降低；在十二指腸中段