HIF-1α對(duì)一次性運(yùn)動(dòng)骨骼肌ERRα-γ蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：運(yùn)動(dòng)、HIF和ERR與機(jī)體能量代謝及相關(guān)代謝性疾病都有關(guān)系，但三者之間的具體關(guān)系和相互作用機(jī)制及其共同對(duì)能量代謝的調(diào)節(jié)目前并不十分清楚。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)陰性對(duì)照型小鼠、HIF-1α基因低表達(dá)小鼠以及HIF-1α基因高表達(dá)小鼠進(jìn)行1小時(shí)和6小時(shí)一次性耐力運(yùn)動(dòng)，檢測(cè)各組小鼠骨骼肌ERRα和ERRγ核蛋白及其靶基因mRNA的表達(dá)，探討不同時(shí)間一次性耐力運(yùn)動(dòng)HIF-1α對(duì)ERRα和ERRγ核蛋白及其下游靶基因的影響，以進(jìn)一步揭示HIF-1α與

2、一次性耐力運(yùn)動(dòng)骨骼肌ERRα、ERRγ糖脂代謝調(diào)節(jié)的關(guān)系。
　　方法：陰性對(duì)照小鼠和HIF-1α基因高、低表達(dá)鼠各30只，根據(jù)體重，每組10只，隨機(jī)分為3組，分別為安靜組、1h運(yùn)動(dòng)組和6h運(yùn)動(dòng)組，共9組。做一次性跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，速度20m/min，坡度5％，運(yùn)動(dòng)組運(yùn)動(dòng)時(shí)間分別為1h和6h。正式試驗(yàn)前兩天，運(yùn)動(dòng)組小鼠進(jìn)行10min適應(yīng)性的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)。為了保證小鼠跑臺(tái)跑運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度，在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中采用聲音刺激和用棍棒刺激動(dòng)物尾部。在整個(gè)運(yùn)動(dòng)過(guò)程中未

3、對(duì)動(dòng)物使用任何電刺激。運(yùn)動(dòng)組運(yùn)動(dòng)后3小時(shí)取材。Western blot法測(cè)定ERRα、ERRγ核蛋白含量。Real-Time PCR法測(cè)定MCAD、PPARα和NRF1的mRNA含量。
　　結(jié)果：（1）相對(duì)安靜組，一次性耐力運(yùn)動(dòng)1小時(shí)和6小時(shí)，陰性對(duì)照鼠的核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因mRNA表達(dá)均有增加，且6小時(shí)比1小時(shí)增加幅度大（2）安靜狀態(tài)下，HIF-1α基因低表達(dá)鼠的核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因mRNA表達(dá)增加，

4、高表達(dá)鼠的反而減少（3）一次性耐力運(yùn)動(dòng)1小時(shí)，HIF-1α基因低表達(dá)鼠的核蛋白ERRγ表達(dá)及其靶基因增加，高表達(dá)鼠的反而減少（4）一次性耐力運(yùn)動(dòng)6小時(shí)，轉(zhuǎn)基因鼠的核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因mRNA表達(dá)變化不明顯。
　　結(jié)論：（1）隨運(yùn)動(dòng)時(shí)間的延長(zhǎng)，小鼠骨骼肌ERRα/γ核蛋白表達(dá)增加；（2）HIF-1α的蛋白表達(dá)量的適度增加，有助于促進(jìn)安靜鼠骨骼肌核蛋白ERRα/γ蛋白及其靶基因mRNA的表達(dá)，而HIF-1α蛋白的過(guò)度表達(dá)