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文檔簡介
1、目的:建立體外無血清饑餓培養(yǎng)成年鼠心肌細胞模型,利用藥物三碘甲狀腺原氨酸(T3)干預,觀察T3對無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細胞是否具有保護作用及與Fas系統(tǒng)表達的關系。
方法:無血清M199培養(yǎng)基原代培養(yǎng)成年鼠心肌細胞,光鏡下觀察細胞形態(tài),臺盼藍染色評價細胞活性、計數(shù),心肌細胞隨機分為對照組、T3組,培養(yǎng)48小時后,流式細胞儀檢測心肌細胞凋亡,Western blotting測定Fas、FasL蛋白在心肌細胞的表達變化。
2、 結果:每只成年SD大鼠細胞產(chǎn)量可獲得(4-7)×106個,其中75%~85%復鈣后為具有活性的心室肌細胞,細胞呈桿狀、橫紋清晰、折光性好、兩端邊緣銳利,其中5%-10%桿狀細胞有自發(fā)性收縮;T3對無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細胞具有保護作用:心肌細胞無血清培養(yǎng)48小時后,流式細胞儀檢測心肌細胞凋亡,T3組心肌細胞凋亡率(13.26±2.46%)較對照組(44.32±6.12%)明顯降低(P<0.05);Western blotting檢
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