T3對(duì)無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及Fas系統(tǒng)相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的:建立體外無血清饑餓培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞模型,利用藥物三碘甲狀腺原氨酸(T3)干預(yù),觀察T3對(duì)無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞是否具有保護(hù)作用及與Fas系統(tǒng)表達(dá)的關(guān)系。
　　 方法:無血清M199培養(yǎng)基原代培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞,光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),臺(tái)盼藍(lán)染色評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、計(jì)數(shù),心肌細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、T3組,培養(yǎng)48小時(shí)后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡,Western blotting測(cè)定Fas、FasL蛋白在心肌細(xì)胞的表達(dá)變化。

2、　　 結(jié)果:每只成年SD大鼠細(xì)胞產(chǎn)量可獲得(4-7)×106個(gè),其中75％～85％復(fù)鈣后為具有活性的心室肌細(xì)胞,細(xì)胞呈桿狀、橫紋清晰、折光性好、兩端邊緣銳利,其中5％-10％桿狀細(xì)胞有自發(fā)性收縮；T3對(duì)無血清培養(yǎng)成年鼠心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用:心肌細(xì)胞無血清培養(yǎng)48小時(shí)后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡,T3組心肌細(xì)胞凋亡率(13.26±2.46％)較對(duì)照組(44.32±6.12％)明顯降低(P<0.05)；Western blotting檢