黃芩苷對原代培養(yǎng)大鼠心肌細胞的保護作用.pdf

1、目的： 1、證明黃芩苷對體外培養(yǎng)的大鼠心肌細胞具有保護作用。 2、闡明黃芩苷的這一保護作用與其直接調(diào)節(jié)心肌細胞產(chǎn)生炎性細胞因子有關(guān)。 3、探討黃芩苷調(diào)節(jié)細胞因子的可能機制。 方法： 1、原代培養(yǎng)大鼠乳鼠心肌細胞，培養(yǎng)三天后隨機分為正常組、H/R組、H/R+BA組、TNF-α損傷組、TNF-α+BA組。 2、H/R組將細胞放入自制缺氧盒（37℃，95％ N2和5％ O2）培養(yǎng)12h然后再給氧

2、1h；TNF-α組以100 ng/mL rrTNF-α孵育13h；黃芩苷用藥組，在缺血/再灌注和TNF-α損傷模型前30min加入10μM黃芩苷到細胞培養(yǎng)液，余步驟同模型組；正常組常規(guī)條件（混合空氣中，37℃，5％ CO2）培養(yǎng)13h。 3、MTT法測細胞活力。 4、用SOD試劑盒測細胞培養(yǎng)液中的SOD活力。 5、用ELASA法測細胞培養(yǎng)液中TNF-α，IL-6，IL-10水平。 6、SP免疫組化法測定心

3、肌細胞的NF-κB核定位和表達情況。 7、透射電鏡觀察心肌細胞超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果： 1、缺血/再灌注損傷造成心肌細胞損傷和死亡，降低SOD活力和提高培養(yǎng)液中炎性細胞因子TNF-α的水平。外源性TNF-α同樣減少細胞活力但并不影響SOD活力。 2、缺血/再灌注和TNF-α損傷升高IL-6水平，IL-10水平降低，并且促使NF-κB核轉(zhuǎn)位。 3、10μM黃芩苷可以顯著減少缺血/再灌注和TNF-α導(dǎo)致的細

4、胞損傷。 4、黃芩苷提升缺血/再灌注細胞培養(yǎng)液中SOD活力，降低TNF-α、IL-6水平。 5、黃芩苷提高缺血/再灌注和TNF-α損傷細胞培養(yǎng)液中IL-10的水平。 6、黃芩苷抑制NF-κB的表達和核轉(zhuǎn)位。 7、黃芩苷保護細胞的超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)論： 1、黃芩苷減輕缺血/再灌注和TNF-α誘導(dǎo)的培養(yǎng)大鼠心肌細胞的損傷。 2、保護性機制與黃芩苷降低心肌細胞產(chǎn)生致炎因子TNF-α和IL-6