心肌細(xì)胞特異性敲除Cdc42對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、背景和目的：心臟缺血再灌注損傷和心肌肥大是兩種常見的心臟疾病，兩者都可導(dǎo)致心臟功能障礙和心力衰竭。目前對其細(xì)胞內(nèi)相關(guān)信號通路的研究仍然不十分清楚。Rho家族的小分子G蛋白Cdc42，主要是作為一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的分子開關(guān)，參與細(xì)胞極化、基因轉(zhuǎn)錄、遷移、細(xì)胞骨架形成和癌細(xì)胞侵襲等細(xì)胞活動。本研究的目的旨在觀察Cdc42缺失對心臟缺血再灌注損傷的影響，并對其可能的分子機(jī)制進(jìn)行探討。
　　材料與方法：利用Cdc42flox/flox小鼠和MLC

2、-2C-Cre小鼠進(jìn)行雜交得到生長發(fā)育良好且可以穩(wěn)定繁殖的心臟特異性敲除Cdc42flox/flox[Cre]小鼠。利用Langendorff系統(tǒng)灌流離體心臟造成缺血再灌注損傷，通過觀察流量的變化情況和心肌細(xì)胞釋放 LDH的量分析心臟損傷的嚴(yán)重程度。利用異丙腎上腺素（Isoprenaline，簡稱ISO）和血管緊張素Ⅱ（Angiotensin II，簡稱AngⅡ）兩種不同的藥物處理體外成年心肌細(xì)胞，并檢測相關(guān)基因的表達(dá)變化以及分析Cdc

3、42調(diào)控的信號傳導(dǎo)途徑。
　　結(jié)果：我們觀察到，在控制灌注壓穩(wěn)定的條件下心肌特異性敲除Cdc42小鼠心臟在缺血再灌注損傷時(shí)，與正常小鼠組比較，其冠脈灌流量增加，而心肌細(xì)胞釋放的LDH含量明顯減少。在藥物處理體外成年心肌細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)Cdc42缺失可明顯降低異丙腎上腺素引起的糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）和鈣調(diào)磷酸酶催化亞基A（PPP3CA）表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子GATA4和Mef2的表達(dá)。
　　結(jié)論：我們成功構(gòu)建