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文檔簡介
1、研究背景及目的:心血管疾病是最常見的疾病病種,冠心病是心血管疾病重要的組成部分,也是心血管疾病中最常見的死因。對于嚴(yán)重的冠心病,冠狀動脈旁路移植術(shù)是其主要的治療方法。外科手術(shù)常用的取材有兩種:左乳內(nèi)動脈和大隱靜脈。相較于乳內(nèi)動脈血管橋的較好的遠(yuǎn)期通暢率,大隱靜脈血管橋遠(yuǎn)期通暢率不容樂觀。3-羥基苯甲醛(3-HBA)是一種原兒茶醛的前體,有研究表明原兒茶醛類物質(zhì)有心血管保護(hù)作用。但并無3-HBA對靜脈橋作用的研究。本實驗通過研究3-HBA
2、對人大隱靜脈血管平滑肌細(xì)胞及兔自體移植靜脈橋內(nèi)膜增生的影響,以其尋找一種新的能夠防治冠狀動脈旁路移植術(shù)后靜脈橋狹窄的藥物。
研究方法:1.人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),設(shè)立對照組,以及藥物梯度組(25,50,100μmol/L),作用人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞24h后,用MTT法檢測細(xì)胞增殖情況,Transwell小室法檢測細(xì)胞遷移情況,流式細(xì)胞儀(Flow Cytometry,F(xiàn)CM)檢測細(xì)胞凋亡情況,Western Blot
3、檢測p-AKT蛋白表達(dá)情況。2.選取24只健康的實驗用新西蘭兔,不限雌雄,體重在2000g-2500g之間,編號,計算機(jī)隨機(jī)法分成實驗組A組和對照組B組,每組再均分為兩個亞組,即A1、A2組和B1、B2組,每個亞組6只兔子,建立同側(cè)頸外靜脈移植到頸總動脈的實驗動物模型,A組動物從耳緣靜脈注射3-HBA100mg/(kg·d),B組動物給予同劑量生理鹽水以作對照。給藥時間一直持續(xù)至取材前一天。A1、B1組動物于模型建立后的第2周采集移植靜
4、脈橋,A2、B2組動物于模型建立后4周采集移植靜脈橋,計算機(jī)圖形軟件計算靜脈橋內(nèi)膜厚度,并用蛋白印記法(Western Blot)對各組移植靜脈橋中AKT蛋白的磷酸化情況進(jìn)行檢測。
結(jié)果:1.藥物干預(yù)人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞24h后,相比于對照組,實驗組細(xì)胞增殖與遷移能力均受到明顯抑制,并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性,流式細(xì)胞儀凋亡檢測發(fā)現(xiàn)其中晚期凋亡細(xì)胞比例明顯增加,Western blot實驗發(fā)現(xiàn)p-AKT表達(dá)明顯減少,p<0.05,
5、差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。2.24只兔子行搭橋模型成功,無明顯的手術(shù)切口感染。術(shù)后2周時,實驗組A1組靜脈橋內(nèi)膜厚度為76.57±6.76μm,而同期對照組B1組靜脈橋內(nèi)膜厚度為87.32±6.89μm,實驗組組靜脈橋內(nèi)膜厚度較對照組已經(jīng)稍有減小,p=0.123,差異無統(tǒng)計學(xué)意義;到4周時,實驗組A2內(nèi)膜厚度為45.39±9.41μm,對照組B2組內(nèi)膜厚度為134.07±18.80μm,p<0.05,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。無論2周或者4周時,p
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