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文檔簡介
1、目的:用氯喹處理哮喘小鼠,了解氯喹對哮喘小鼠是否具有治療作用,并探討其可能機制。
方法:將6-8周齡SPF級Balb/c小鼠隨機分為對照組、哮喘組、氯喹治療組、地塞米松治療組、氯喹+地塞米松治療組,除對照組外,其余各組小鼠均給予OVA致敏和激發(fā),建立哮喘小鼠模型,于每次激發(fā)前腹腔注射給藥,對照組小鼠則于同一時間用PBS處理,最后1次激發(fā)后24 h內(nèi)小鼠肺功能儀檢測小鼠氣道高反應(yīng)性;檢測支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)及分類計數(shù);制作
2、肺組織病理切片,HE染色后光鏡下觀察病理變化;ELISA檢測支氣管肺泡灌洗液中細胞因子IFN-γ、IL-6、IL-1β、PGE2、 PGF2α水平;熒光定量PCR檢測肺組織勻漿PLA2G4A mRNA和GR mRNA水平;免疫組織化學(xué)檢測肺組織GR蛋白水平。
結(jié)果:氯喹可明顯降低哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性;明顯降低哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中細胞計數(shù)及嗜酸性粒細胞、中性粒細胞計數(shù);明顯降低哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中PGF2α因子水平;
3、明顯增加哮喘小鼠肺組織勻漿PLA2G4A mRNA水平;明顯增加地塞米松治療后小鼠肺組織GR蛋白水平。地塞米松治療組小鼠氣道上皮細胞(特別是胞核)GR蛋白水平較其余各組均有所降低,但僅和氯喹單獨治療組相比差異具有顯著性。氯喹與地塞米松合用可明顯減輕哮喘小鼠氣道、血管周圍炎癥;可明顯降低哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中前炎癥細胞因子IL-6水平;明顯增加哮喘小鼠肺組織勻漿PLA2G4A mRNA水平;可增加小鼠氣道上皮GR蛋白水平,雖然差異不具
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