亞甲藍(lán)對(duì)EAE小鼠的治療作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　研究亞甲藍(lán)（methylene blue，MB）對(duì)由髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG）誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）小鼠發(fā)病的影響，觀察小鼠脾組織中Th17、Treg細(xì)胞的比例變化，初步探討MB對(duì)EAE小鼠的治療作用以及可能免疫機(jī)制。
　　方法：

2、>　　1.將24只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為EAE組、MB組和control組，每組分別8只。以MOG35-55為抗原免疫，輔以百日咳毒素、完全弗氏佐劑及結(jié)核菌素，建立小鼠EAE模型，control組不免疫。免疫當(dāng)天記為第0天，自免疫第1天開(kāi)始給藥，MB組小鼠給予MB20mg/kg每日腹腔注射；control組及EAE組小鼠每日給予等體積生理鹽水腹腔注射。觀察小鼠的發(fā)病時(shí)間和每日神經(jīng)功能評(píng)分。
　　2.將18只C57BL/6小鼠隨

3、機(jī)分為EAE組、MB組和control組，每組分別6只。以MOG35-55為抗原免疫，輔以百日咳毒素、完全弗氏佐劑及結(jié)核菌素，建立小鼠EAE模型，control組不免疫。免疫當(dāng)天記為第0天，自免疫第1天開(kāi)始給藥，MB組小鼠給予MB20mg/kg每日腹腔注射；control組及EAE組小鼠每日給予等體積生理鹽水腹腔注射。免疫后25天（發(fā)病高峰期）將小鼠處死，無(wú)菌條件下取出小鼠的脾臟。流式細(xì)胞學(xué)方法測(cè)定小鼠脾組織細(xì)胞中Th17和Treg細(xì)胞

4、的比例。
　　結(jié)果：
　　1.各組小鼠發(fā)病情況：EAE組和MB組小鼠發(fā)病率均為100％，發(fā)病高峰期在免疫后25天左右。與EAE組相比，MB組發(fā)病高峰期的神經(jīng)功能評(píng)分明顯降低（P<0.01）；MB組的發(fā)病時(shí)間較EAE組晚（P<0.05）。control組小鼠不發(fā)??；
　　2.各組小鼠脾組織中Treg細(xì)胞的比例變化：在發(fā)病高峰期，各組小鼠脾組織中Treg細(xì)胞比例均有明顯差別。與control組相比，EAE組小鼠脾組織中Tr

5、eg細(xì)胞比例明顯降低（P<0.01）；與EAE組和 control組相比， MB組小鼠脾組織中Treg細(xì)胞比例明顯升高（P<0.01）；
　　3.各組小鼠脾組織中Th17細(xì)胞的比例變化：在發(fā)病高峰期，與control組相比，EAE小鼠脾組織中Th17細(xì)胞比例明顯升高（P<0.05）；與EAE組對(duì)比，MB組小鼠脾組織中Th17細(xì)胞比例明顯降低（P<0.05）；但MB組與control組相比，小鼠脾組織中Th17細(xì)胞比例無(wú)明顯差異（P