亞甲藍對EAE小鼠的治療作用及機制研究.pdf

1、目的：
　　研究亞甲藍（methylene blue，MB）對由髓鞘少突膠質細胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG）誘導的實驗性自身免疫性腦脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）小鼠發(fā)病的影響，觀察小鼠脾組織中Th17、Treg細胞的比例變化，初步探討MB對EAE小鼠的治療作用以及可能免疫機制。
　　方法：

2、>　　1.將24只C57BL/6小鼠隨機分為EAE組、MB組和control組，每組分別8只。以MOG35-55為抗原免疫，輔以百日咳毒素、完全弗氏佐劑及結核菌素，建立小鼠EAE模型，control組不免疫。免疫當天記為第0天，自免疫第1天開始給藥，MB組小鼠給予MB20mg/kg每日腹腔注射；control組及EAE組小鼠每日給予等體積生理鹽水腹腔注射。觀察小鼠的發(fā)病時間和每日神經(jīng)功能評分。
　　2.將18只C57BL/6小鼠隨

3、機分為EAE組、MB組和control組，每組分別6只。以MOG35-55為抗原免疫，輔以百日咳毒素、完全弗氏佐劑及結核菌素，建立小鼠EAE模型，control組不免疫。免疫當天記為第0天，自免疫第1天開始給藥，MB組小鼠給予MB20mg/kg每日腹腔注射；control組及EAE組小鼠每日給予等體積生理鹽水腹腔注射。免疫后25天（發(fā)病高峰期）將小鼠處死，無菌條件下取出小鼠的脾臟。流式細胞學方法測定小鼠脾組織細胞中Th17和Treg細胞

4、的比例。
　　結果：
　　1.各組小鼠發(fā)病情況：EAE組和MB組小鼠發(fā)病率均為100％，發(fā)病高峰期在免疫后25天左右。與EAE組相比，MB組發(fā)病高峰期的神經(jīng)功能評分明顯降低（P<0.01）；MB組的發(fā)病時間較EAE組晚（P<0.05）。control組小鼠不發(fā)病；
　　2.各組小鼠脾組織中Treg細胞的比例變化：在發(fā)病高峰期，各組小鼠脾組織中Treg細胞比例均有明顯差別。與control組相比，EAE組小鼠脾組織中Tr

5、eg細胞比例明顯降低（P<0.01）；與EAE組和 control組相比， MB組小鼠脾組織中Treg細胞比例明顯升高（P<0.01）；
　　3.各組小鼠脾組織中Th17細胞的比例變化：在發(fā)病高峰期，與control組相比，EAE小鼠脾組織中Th17細胞比例明顯升高（P<0.05）；與EAE組對比，MB組小鼠脾組織中Th17細胞比例明顯降低（P<0.05）；但MB組與control組相比，小鼠脾組織中Th17細胞比例無明顯差異（P