增齡對(duì)小鼠肺纖維化模型端粒酶活性影響的研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)對(duì)青年小鼠及老年小鼠的肺纖維化過(guò)程中E-鈣粘蛋白(E-Cadherin, E-Cad)、α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT）的表達(dá)水平進(jìn)行研究，對(duì)比不同年齡的小鼠肺纖維化模型病變的程度及端粒酶活性的高低，研究增齡對(duì)小鼠肺纖維化程度及纖維化過(guò)程中端粒酶活性變化的影響。
　　方法：
　　將50只20周齡的雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為兩組，其中25只小鼠作

2、為青年組，另外25只飼養(yǎng)25周作為老年組，將青年組及老年組再隨機(jī)分成對(duì)照組(n=5)及博來(lái)霉素（BLM）造模組(n=20)。對(duì)照組氣管注入0.9％氯化鈉注射液于第28天處死，留取左肺；博來(lái)霉素造模組小鼠平均分為四組，每組5只，分別在氣管注入博萊霉素稀釋液（5mg/kg）的第7、14、21、28天處死，留取左肺標(biāo)本。對(duì)肺組織進(jìn)行HE染色及Masson染色，觀察小鼠肺纖維化模型是否造模成功。運(yùn)用肺組織石蠟切片免疫組化染色法，對(duì)可反映小鼠肺纖

3、維化病變程度的上皮細(xì)胞標(biāo)志蛋白 E-鈣粘蛋白(E-Cadherin, E-Cad)，間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及可反映端粒酶功能活性的指標(biāo)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT）進(jìn)行平均灰度值檢測(cè)，對(duì)比各項(xiàng)指標(biāo)在青年小鼠和老年小鼠的對(duì)照組與造模組間的差異，結(jié)果分析采用獨(dú)立樣本量t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析法并對(duì)其進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　　小鼠肺組織石蠟切片HE染色及Masson染色結(jié)果表明氣管注

4、入BLM誘導(dǎo)小鼠肺纖維化模型成功。老年小鼠肺纖維化病變程度較青年小鼠嚴(yán)重。
　　在模型組中，與青年組相比，E-Cadherin在老年組中表達(dá)少（P<0.05）；與對(duì)照組相比，模型組中 E-Cadherin表達(dá)均減少(P<0.05)，且隨造模時(shí)間延長(zhǎng)而減少（P<0.05）。在模型組中，與青年組相比，α-SMA、Vimentin在老年組中表達(dá)增多（P<0.05）；與對(duì)照組相比，模型組中α-SMA、Vimentin表達(dá)增加（P<0.05

5、），且隨造模時(shí)間延長(zhǎng)而增多（P<0.05）。與青年組相比，TERT在老年組中表達(dá)率波動(dòng)范圍大，其陽(yáng)性率隨時(shí)間變化先升后降（P<0.001），于第14天達(dá)到最高峰處，28天降回第7天程度。
　　結(jié)論：
　　氣管注入BLM（5mg/kg）誘導(dǎo)小鼠肺纖維化模型成功，老年小鼠普遍比青年小鼠肺病變程度嚴(yán)重。肺纖維化過(guò)程中，E-鈣粘素(E-Cadherin, E-Cad)表達(dá)下降，α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)及波形蛋白(Vimenti