增齡對小鼠肺纖維化模型端粒酶活性影響的研究.pdf

1、目的：
　　通過對青年小鼠及老年小鼠的肺纖維化過程中E-鈣粘蛋白(E-Cadherin, E-Cad)、α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT）的表達水平進行研究，對比不同年齡的小鼠肺纖維化模型病變的程度及端粒酶活性的高低，研究增齡對小鼠肺纖維化程度及纖維化過程中端粒酶活性變化的影響。
　　方法：
　　將50只20周齡的雄性C57BL/6小鼠隨機分為兩組，其中25只小鼠作

2、為青年組，另外25只飼養(yǎng)25周作為老年組，將青年組及老年組再隨機分成對照組(n=5)及博來霉素（BLM）造模組(n=20)。對照組氣管注入0.9％氯化鈉注射液于第28天處死，留取左肺；博來霉素造模組小鼠平均分為四組，每組5只，分別在氣管注入博萊霉素稀釋液（5mg/kg）的第7、14、21、28天處死，留取左肺標本。對肺組織進行HE染色及Masson染色，觀察小鼠肺纖維化模型是否造模成功。運用肺組織石蠟切片免疫組化染色法，對可反映小鼠肺纖

3、維化病變程度的上皮細胞標志蛋白 E-鈣粘蛋白(E-Cadherin, E-Cad)，間質(zhì)細胞標志蛋白α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及可反映端粒酶功能活性的指標端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT）進行平均灰度值檢測，對比各項指標在青年小鼠和老年小鼠的對照組與造模組間的差異，結(jié)果分析采用獨立樣本量t檢驗統(tǒng)計分析法并對其進行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　　小鼠肺組織石蠟切片HE染色及Masson染色結(jié)果表明氣管注

4、入BLM誘導(dǎo)小鼠肺纖維化模型成功。老年小鼠肺纖維化病變程度較青年小鼠嚴重。
　　在模型組中，與青年組相比，E-Cadherin在老年組中表達少（P<0.05）；與對照組相比，模型組中 E-Cadherin表達均減少(P<0.05)，且隨造模時間延長而減少（P<0.05）。在模型組中，與青年組相比，α-SMA、Vimentin在老年組中表達增多（P<0.05）；與對照組相比，模型組中α-SMA、Vimentin表達增加（P<0.05

5、），且隨造模時間延長而增多（P<0.05）。與青年組相比，TERT在老年組中表達率波動范圍大，其陽性率隨時間變化先升后降（P<0.001），于第14天達到最高峰處，28天降回第7天程度。
　　結(jié)論：
　　氣管注入BLM（5mg/kg）誘導(dǎo)小鼠肺纖維化模型成功，老年小鼠普遍比青年小鼠肺病變程度嚴重。肺纖維化過程中，E-鈣粘素(E-Cadherin, E-Cad)表達下降，α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)及波形蛋白(Vimenti