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1、目的:肺纖維化是一種嚴(yán)重的終末期肺部病變,臨床上缺乏有效的治療方法,疾病致死率高。雖然肺纖維化的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,但大量研究表明,早期的炎癥反應(yīng)和由NF-κB調(diào)控表達(dá)的多種細(xì)胞因子在其中起著重要作用。槲皮素(quercetin,3,3’,4’,5,7-五羥基黃酮,Que)是一種在植物中廣泛分布的黃酮類化合物,具有抗炎、抗氧化等多種生物學(xué)活性且無(wú)明顯毒副作用。近年來(lái)有體內(nèi)外研究報(bào)道槲皮素還具有抗纖維化的作用,作用機(jī)制不明,推測(cè)可能與其
2、抗炎、抗氧化作用相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立博萊霉素(bleomycin,Bleo)誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化模型,采用脂質(zhì)體(1iposome,Lip)包裹的槲皮素腹腔注射對(duì)其干預(yù),觀察槲皮素對(duì)博萊霉素致小鼠肺纖維化的療效;同時(shí)檢測(cè)NF-κB的表達(dá),進(jìn)一步探討槲皮素的抗纖維化機(jī)制。 方法:本實(shí)驗(yàn)采用氣管內(nèi)一次性注射博萊霉素的方法建立小鼠肺纖維化模型,從建模前一天開(kāi)始腹腔注射脂質(zhì)體包裹槲皮素提前進(jìn)行干預(yù),另設(shè)空脂質(zhì)體治療組、單純Que組及正常對(duì)
3、照組,觀察槲皮素對(duì)博萊霉素誘導(dǎo)的小鼠肺纖維化的治療作用。在博萊霉素處理后第7天行支氣管肺泡灌洗,通過(guò)檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液(BALF)中的炎性細(xì)胞數(shù),觀察槲皮素對(duì)博來(lái)霉素所致肺急性炎癥的影響;在博萊霉素處理后第28天處死小鼠,測(cè)定其肺組織羥脯氨酸含量,定量了解肺纖維化情況;制備肺組織石蠟切片,行HE染色觀察肺組織形態(tài)學(xué)改變;采用real-time RT-PCR檢測(cè)肺組織NF-κB的表達(dá);實(shí)驗(yàn)期間記錄小鼠的生存情況。 結(jié)果:在博萊霉
4、素引起的早期肺炎癥反應(yīng)中,與對(duì)照組相比,槲皮素治療組BALF中的巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少;小鼠肺組織石蠟切片HE染色顯示:與單純Bleo組及空Lip治療組相比,槲皮素治療組肺組織纖維化區(qū)域較少,且程度較輕;肺組織羥脯氨酸含量測(cè)定顯示,槲皮素治療組其羥脯氨酸含量較單純Bleo組及空Lip治療組明顯降低;real-time RT-PCR檢測(cè)肺組織NF-κB發(fā)現(xiàn),槲皮素治療組NF-κB的表達(dá)較單純Bleo組及空Lip治療組明顯
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