CXCL12-CXCR4軸、IL-21以及miR-155在支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、第一部分趨化因子受體CXCR4抑制劑通過降低Th17和Tc17細(xì)胞免疫應(yīng)答減輕卵清蛋白所致的氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性
　　目的：CXCL12/CXCR4軸以及Th17/Tc17細(xì)胞均在哮喘的發(fā)病機(jī)制中扮演重要的角色，本研究旨在探討在支氣管發(fā)病機(jī)制中CXCL12/CXCR4軸對Th17/Tc17細(xì)胞調(diào)控作用。
　　方法：復(fù)制卵清蛋白（OVA）誘導(dǎo)的急性哮喘小鼠模型在激發(fā)之前給予CXCR4的抑制劑AMD3100干預(yù)。FlexiVe

2、nt小鼠肺功能儀測定小鼠氣道反應(yīng)性，觀察BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù)，肺組織HE染色觀察氣道炎癥情況，ELISA檢測BALF中Th2細(xì)胞因子水平，并制作肺組織單細(xì)胞懸液，用流式細(xì)胞術(shù)檢測Tc17/Th17細(xì)胞比例，ELISA檢測肺組織勻漿中IL-17濃度。
　　結(jié)果：AMD3100干預(yù)減輕了哮喘小鼠BALF以及氣道周圍炎癥細(xì)胞浸潤，降低了氣道高反應(yīng)性，減少了BALF中Th2細(xì)胞因子的表達(dá)水平。AMD3100干預(yù)也降低了哮喘小鼠

3、肺組織中Th17和Tc17細(xì)胞的比例以及肺組織勻漿中IL-17的表達(dá)水平。
　　結(jié)論：我們的結(jié)果表明，阻斷CXCL12-CXCR4生物學(xué)軸后哮喘炎癥顯著減輕，這一效應(yīng)可能與Th17/Tc17細(xì)胞免疫應(yīng)答降低有關(guān)。
　　第二部分 IL-21在哮喘慢性炎癥及氣道重塑中的作用研究
　　目的：IL-21與IL-2、IL-4、以及IL-15同屬Ⅰ類細(xì)胞因子超家族。有文獻(xiàn)報道IL-21能顯著減輕過敏性鼻炎小鼠鼻粘膜炎癥。本實驗旨在

4、以在體干預(yù)方式探討IL-21/IL-21R信號通路對慢性哮喘氣道炎癥和氣道重塑的影響。
　　方法：復(fù)制卵清蛋白（OVA）誘導(dǎo)的慢性哮喘小鼠模型，通過ELISA方法檢測各組小鼠血清和肺泡灌洗液（BALF）中IL-21表達(dá)水平。另外我們給予慢性哮喘模型小鼠重組IL-21或者抗IL-21R的抗體干預(yù)，F(xiàn)lexiVent小鼠肺功能儀測定小鼠氣道反應(yīng)性，觀察BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù)，肺組織HE染色觀察氣道炎癥情況，ELISA檢測BA

5、LF中細(xì)胞因子水平。
　　結(jié)果：慢性哮喘組小鼠血清中IL-21濃度顯著高于陰性對照組。IL-21或者抗IL-21R的抗體干預(yù)慢性哮喘慢性小鼠，其BALF中炎癥細(xì)胞浸潤、氣道周圍炎癥、氣道高反應(yīng)性以及BALF中細(xì)胞因子水平無明顯變化。
　　結(jié)論：IL-21/IL-21R信號通路可能在慢性哮喘炎癥及氣道重塑發(fā)生發(fā)展中無明顯作用。
　　第三部分小鼠MicroRNA-155基因RNA干擾慢病毒載體減輕了哮喘模型的氣道炎癥及氣道

6、高反應(yīng)性
　　目的：MiR-155近來引起廣泛的關(guān)注，其在多個免疫應(yīng)答過程中起著多種調(diào)節(jié)功能。miR-155基因缺失減輕了過敏性氣道炎癥。我們的研究旨在探討miR-155 RNA干擾慢病毒載體對哮喘的治療作用。
　　方法：我們制備了卵清蛋白（OVA）誘導(dǎo)的小鼠急性哮喘模型，并檢測了肺組織中的miR-155的表達(dá)水平。在激發(fā)之前給予miR-155 RNA干擾慢病毒載體干預(yù)。FlexiVent小鼠肺功能儀測定小鼠氣道反應(yīng)性，觀察

7、BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù)和分類計數(shù)，肺組織HE染色觀察氣道炎癥情況，ELISA檢測BALF中Th2細(xì)胞因子水平。
　　結(jié)果：miR-155在哮喘小鼠肺組織中表達(dá)升高，氣管注入miR-155 RNA干擾慢病毒載體成功降低了哮喘小鼠肺組織中miR-155的表達(dá)。miR-155 RNA干擾慢病毒干預(yù)顯著減輕了OVA所致的過敏性氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性以及BALF中的Th2細(xì)胞因子表達(dá)。
　　結(jié)論：我們的研究結(jié)果強(qiáng)調(diào)了miR-155在哮