益氣養(yǎng)陰活血方對(duì)T2DM大鼠胰島素抵抗及肝臟miRNA-126表達(dá)水平的影響.pdf

1、目的：通過(guò)測(cè)定大鼠肝臟miRNA-126的表達(dá)水平，探討益氣養(yǎng)陰活血方改善2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用機(jī)制，為中藥復(fù)方治療糖尿病提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：12周齡Wistar大鼠60只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為空白組10只和糖尿病組50只，糖尿病組大鼠采用高脂飲食喂養(yǎng)加小劑量鏈尿佐菌素（STZ）腹腔注射誘導(dǎo)形成2型糖尿病大鼠模型，造模成功后，將成膜2型糖尿病大鼠隨機(jī)分為5組：模型組、津力達(dá)組、益氣養(yǎng)陰活血方低、中、高劑量組

2、，分別予生理鹽水、津力達(dá)顆粒、益氣養(yǎng)陰活血方低、中、高劑量灌胃干預(yù)，同時(shí)空白組給予同等體積的生理鹽水灌胃干預(yù)。各組大鼠干預(yù)過(guò)程中，監(jiān)測(cè)大鼠的體重變化和血糖變化；干預(yù)5周后，于末次給藥禁食12h后，腹主動(dòng)脈取血測(cè)定空腹血糖（FBG）、空腹胰島素水平（FINS）、血脂四項(xiàng)（TC、TG、LDL-C、HDL-C）等生化指標(biāo)，并計(jì)算胰島素敏感指數(shù)（ISI）和胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）；隨后處死大鼠，取其肝臟組織，應(yīng)用HE染色法，對(duì)大鼠肝臟組

3、織進(jìn)行病理學(xué)檢查；應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)大鼠肝臟組織中miRNA-126的表達(dá)水平，探討益氣養(yǎng)陰活血方改善糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：12型糖尿病大鼠模型的建立：高脂飲食喂養(yǎng)4周聯(lián)合小劑量腹腔注射鏈脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以FBG≥16.7mmol/L為造模成功。2對(duì)各組大鼠體重的影響：益氣養(yǎng)陰活血方中、高劑量組和津力達(dá)顆粒均能顯著降低2型糖尿病大鼠的體重水平（P＜0.05），但三者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0

4、.05）。3對(duì)各組大鼠FBG、2hBG、FINS、ISI和HOMA-IR的影響：與模型組比較，益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組和津力達(dá)組均能不同程度地降低大鼠FBG、2hBG、FINS水平和HOMA-IR，提高ISI，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中以益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組效果更佳，優(yōu)于津力達(dá)組（P＜0.05）。4對(duì)各組大鼠血脂水平的影響：與模型組比較，益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組及津力達(dá)組TC、TG、LDL-C均有不同程度的降低，HDL-C有

5、所升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中以益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組的 TC、LDL-C降低效果最為明顯，且優(yōu)于津力達(dá)組（P＜0.05）。5對(duì)各組大鼠肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響：空白組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)正常，肝小葉清晰完整，肝細(xì)胞無(wú)明顯病變，無(wú)增生、水腫、脂肪變性等。模型組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)破壞明顯，肝索排列紊亂，肝細(xì)胞腫脹變性，小葉內(nèi)可見(jiàn)片狀壞死灶，且有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，肝臟組織損傷嚴(yán)重。與模型組比較，益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組及津力達(dá)組均能不同程度地

6、減輕大鼠肝臟組織病理?yè)p害，尤其以益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組效果最為明顯，具體表現(xiàn)在肝小葉、肝索結(jié)構(gòu)可見(jiàn)，肝細(xì)胞基本正常，偶見(jiàn)少量肝細(xì)胞脂肪變性及炎細(xì)胞浸潤(rùn)，肝臟組織受損輕微。6對(duì)大鼠肝臟組織中miRNA-126表達(dá)水平的影響：與模型組相比，益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組和津力達(dá)組的miRNA-126相對(duì)表達(dá)量均有不同程度的降低（P＜0.05）；與津力達(dá)組相比，益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組降低miRNA-126表達(dá)水平的效果更明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜