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文檔簡(jiǎn)介
1、聚羥基脂肪酸酯(PHA)是一類(lèi)廣泛存在于多種微生物細(xì)胞內(nèi)的儲(chǔ)能型高分子聚合物。因其兼具多樣的材料學(xué)性能、生物相容性、生物可降解性及生物可再生性而倍受科學(xué)界和工業(yè)界的廣泛關(guān)注。聚-3-羥基丁酸酯(PHB)是PHA中結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單、研究最透徹以及最早被工業(yè)化生產(chǎn)的,本論文對(duì)重組大腸桿菌中PHB的生物合成與NAD(H)激酶的過(guò)表達(dá)之間的關(guān)系進(jìn)行了研究,提高了PHB的產(chǎn)量和碳源轉(zhuǎn)化率,取得的主要研究結(jié)果如下:
在attB-attP位點(diǎn)特異
2、性重組技術(shù)的幫助下,將多個(gè)NAD激酶基因yfjB插入到大腸桿菌染色體上。在不影響細(xì)胞生長(zhǎng)代謝的情況下,重組菌中PHB產(chǎn)量在48 h搖瓶培養(yǎng)中達(dá)3.04 g.L-1,比對(duì)照菌提高了30%。72 h搖瓶培養(yǎng)后,PHB的產(chǎn)量達(dá)到4.24 g.L-1,是對(duì)照組的1.84倍,碳源轉(zhuǎn)化率提升了43%?;蜣D(zhuǎn)錄分析顯示PHB合成操縱子phaCAB的轉(zhuǎn)錄水平比對(duì)照菌提升了6~8倍,可能是PHB增產(chǎn)的主要原因。
研究了質(zhì)粒水平過(guò)表達(dá)NADH激酶
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