Gsdma3基因在小鼠毛囊發(fā)育和周期中的表達(dá)及作用的初步研究.pdf

1、Gsdma3是在2004年被鑒定出來的新基因，特異性地表達(dá)在小鼠的皮膚中，可能是一個(gè)突變熱點(diǎn)基因。已經(jīng)報(bào)道的6個(gè)該基因的突變體，都不同程度地影響了小鼠表皮和毛囊周期。以往對該基因的研究多停留在突變的鑒定和表型分析上，對該基因的表達(dá)研究尚無定論，對該基因的功能研究則更少。
　　 目的:
　　 1、闡明Gsdma3在小鼠毛囊發(fā)育和周期過程中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律；2、初步研究其在表皮角質(zhì)形成細(xì)胞增殖調(diào)控中的作用。
　　 方法

2、:
　　 1、本研究運(yùn)用了免疫組織化學(xué)(IHC)、western blot(WB)以及反轉(zhuǎn)錄PCR(PT-PCR)等多種手段檢測了Gsdma3在C57BL/6小鼠毛囊發(fā)育、毛囊自然周期以及人工誘導(dǎo)同步化毛囊周期中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律；2、在此基礎(chǔ)上，本研究還利用了Gsdma3 突變鼠(AE)，小鼠表皮細(xì)胞株(JB6)和Gsdma3 過表達(dá)質(zhì)粒等材料制備了Gsdma3 功能缺失和過表達(dá)模型，利用IHC、BrdU 標(biāo)記、流式細(xì)胞分析等方法

3、研究了Gsdma3在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖過程中發(fā)揮的作用；3、最后利用基因芯片對新生9天的AE 突變鼠與野生型小鼠皮膚基因表達(dá)差異做了篩選和選擇性驗(yàn)證。
　　 結(jié)果:
　　 1、詳細(xì)地闡明了Gsdma3在小鼠毛囊發(fā)育及周期中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律，并首次證實(shí)了該蛋白定位于細(xì)胞核；2、發(fā)現(xiàn)了Gsdma3對表皮細(xì)胞的增殖具有抑制作用；3、基因芯片篩選出了411個(gè)在AE 突變鼠和野生型小鼠中差異表達(dá)的基因，證實(shí)了Ccl8、Krt6B、Krt7