遼寧絨山羊POMP基因在毛囊發(fā)育中的表達研究.pdf

1、分類號：密級：學校代碼：學號：10165201211001100遣掌師耗火學碩士學位論文⑦遼寧絨山羊POMP基因在毛囊發(fā)育中的表達作者姓名：學科、專業(yè)：研究方向：導師姓名：研究黃楠細胞生物學糖生物學樸君教授2015年3月遼寧師范大學碩士學位論文摘要在本實驗室前期構建的遼寧絨山羊毛囊興盛期cDNA質粒文庫中，經拼接測通后得到了遼寧絨山羊proteasomematurationprotein(POMP)基因序列，旨在研究遼寧絨山羊PMOP基

2、因在毛囊發(fā)育與絨毛生長中的作用。首先對POMP基因進行生物信息學分析，然后利用原位雜交技術對其進行定位分析；RTPCR檢測POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中表達信號；RealTimePCR檢測該基因在毛囊發(fā)育的三個階段的表達以及加入外源褪黑激素和FGF5以及IGF1三種因子對遼寧絨山羊成纖維細胞進行培養(yǎng)后細胞中POMP基因的表達量變化。實驗結果如下：生物信息學分析表明，遼寧絨山羊POMP基因全長1278bp，編碼141個氨基酸，該

3、蛋白基因與牛屬同源性最高；原位雜交結果顯示，在初、次級毛囊中，POMP在內根鞘中表達強烈，在皮質層、角質層以及髓質中也存在表達，外根鞘中未出現(xiàn)表達信號；RTPCR顯示，POMP基因在心、肝、腎、肺、脾、皮膚中均有表達；RealTimePCR檢測結果顯示，在遼寧絨山羊絨毛生長興盛期和退行期，POMP基因次級毛囊中的表達量均高于初級毛囊中的表達量；外源褪黑激素、FGF5以及IGF5細胞因子分別處理成纖維細胞結果顯示，分別加入外源褪黑激素和I

4、GF1后POMP基因表達量低于對照組，加入10^r5)g／t外源FGF5在處理羊成纖維細胞24小時后，POMP基因的表達量高于對照組。此外，褪黑激素和FGF5協(xié)同處理細胞后POMP的表達量低于對照組，褪黑激素與IGF一1協(xié)同作用于成纖維細胞后POMP基因表達量高于對照組。結論：POMP基因普遍存在于遼寧絨山羊各組織器官中，且參與調控初、次級毛囊發(fā)育的過程；外源褪黑激素和IGF1能夠抑制POMP基因的表達；lO^(5)g／L外源FGF5作