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文檔簡介
1、毛囊是表皮重要的附屬器官,它控制著毛發(fā)的生長,對動物的生存有重要的作用。在動物的一生中毛囊都會經(jīng)歷生長期、退化期和靜止期的周期性的循環(huán)變化來實(shí)現(xiàn)毛發(fā)生長和更新。在生長期,毛母質(zhì)細(xì)胞會迅速增殖分化形成內(nèi)根鞘和毛干,毛囊得以向下生長,與此同時(shí),部分毛囊細(xì)胞也發(fā)生一定程度的細(xì)胞凋亡,以此避免細(xì)胞的過度增殖;退化期,毛囊因其下段細(xì)胞發(fā)生大量凋亡而變短且毛乳頭逐漸上移;在毛乳頭上移至毛囊隆突區(qū)bulge下方時(shí)毛囊即進(jìn)入靜止期。在與毛囊周期性循環(huán)的
2、維持相關(guān)的各種信號通路中,TNF-α信號通路起著重要作用。TNF-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)可引起許多細(xì)胞內(nèi)的反應(yīng)來促進(jìn)細(xì)胞增殖,分化,調(diào)亡和誘發(fā)炎癥。TNFR-1作為 TNF-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要的也是起最主要作用的膜受體,其在出生后的小鼠毛囊周期中的表達(dá)部位及在小鼠毛囊周期中的表達(dá)規(guī)律尚沒有系統(tǒng)的研究。
目的:研究腫瘤壞死因子受體1(TNFR-1)在毛囊周期中表達(dá)的規(guī)律及初步作用。可以為揭示其在毛發(fā)周期中及周期的各階段轉(zhuǎn)換中所起的作用奠定一
3、定基礎(chǔ),也可以為研究胞外信號通路在毛囊中的作用機(jī)制帶來啟發(fā),特別是為進(jìn)一步研究TNF-α信號通路對毛囊周期的調(diào)控提供了基礎(chǔ)依據(jù)。
方法:采用石蠟切片免疫熒光、Western blot、RT-PCR等方法檢測小鼠毛囊生長期、退化期和靜止期各時(shí)期TNFR-1的表達(dá)情況(取出生后P8d、P15d、P18d、P24d4個時(shí)相點(diǎn));免疫熒光檢測毛囊細(xì)胞分化標(biāo)記物AE13和AE15的周期性表達(dá);TUNEL檢測毛囊周期中的細(xì)胞凋亡情況。
4、r> 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在所有4個時(shí)相點(diǎn)的皮膚中TNFR-1都存在不同強(qiáng)度的表達(dá),TNFR-1 mRNA從生長期中期(P8d)到生長期末期(P15d)表達(dá)量升高到較高水平,退化期(P18d)和靜止期(P24d)表達(dá)維持在較低水平;TNFR-1蛋白在生長期中期(P8d)和生長期末期(P15d)表達(dá)最強(qiáng),而退化期(P18d)到靜止期(P24d)表達(dá)減弱并維持較弱的表達(dá)。免疫熒光的結(jié)果顯示:TNFR-1在生長期主要表達(dá)于表皮層,毛囊的毛干和
5、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì),生長末期在外根鞘還出現(xiàn)明顯表達(dá);退化期在外根鞘、毛干及表皮層有表達(dá),在次級毛芽出現(xiàn)很強(qiáng)的特異性表達(dá);在靜止期表皮層及杵狀毛中呈現(xiàn)弱表達(dá)。AE13在生長期主要表達(dá)于表皮層以及毛干的皮質(zhì)和毛小皮;退化期P18d在毛干尤其是毛干基部端(即角質(zhì)化區(qū)域和杵狀毛形成區(qū))強(qiáng)表達(dá);在靜止期P24d弱表達(dá)于表皮層及杵狀毛中。AE15在生長中期P8d主要表達(dá)于毛囊內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì),從熒光亮度來看表達(dá)最強(qiáng);生長末期P15d在內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì)
6、也有表達(dá),但是表達(dá)強(qiáng)度明顯變?nèi)?;退化期P18d僅在毛囊殘余內(nèi)根鞘有少許表達(dá);在靜止期P24d毛囊中無明顯AE15表達(dá)。TUNEL檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示:在生長期TUNEL陽性染色主要出現(xiàn)在表皮層,毛囊的毛干、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì),生長末期還出現(xiàn)在外根鞘;在退化期P18d出現(xiàn)在外根鞘、表皮層以及毛干基部端;在靜止期P24d出現(xiàn)在表皮層、杵狀毛、bulge區(qū)和皮脂腺。
結(jié)論:在毛囊周期中,TNFR-1的表達(dá)具有高度的時(shí)空特異性,其表達(dá)與
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