基于hepG2細胞模型的丙烯酰胺危害性風險評估.pdf

1、自從丙烯酰胺于2002年首次在食品中檢測出以來，關于丙烯酰胺的毒性機理研究和安全防護監(jiān)控一直是研究的熱點，各項研究也廣泛開展。經(jīng)過一系列的科學研究和相關報道，丙烯酰胺的形成機制和緩解策略研究已日趨成熟，但受制于傳統(tǒng)的活體動物研究方法，其快速檢測與實時監(jiān)控的方法都受到限制，并且由動物實驗推理出人體實驗還有待考證，因此建立一套完整的人體細胞離體研究體系就成為了大勢所趨。丙烯酰胺風險評估包含多個內(nèi)容:危害識別，危害描述，暴露評估，風險描述和風

2、險管理。而與試驗相關的主要是危害識別，危害描述和暴露評估，風險描述與風險管理則主要是由相關權威機構(gòu)進行分析認證和管理。本文針對這三個部分分別進行了毒理學實驗，系統(tǒng)生物學分析和化學檢測分析的方法來對丙烯酰胺進行風險評估實驗。本課題構(gòu)建了丙烯酰胺研究所用HepG2細胞模型，并利用2.5，5，10，20mM濃度丙烯酰胺對細胞在6h，12h，24h進行處理，通過細胞形態(tài)學分析得出丙烯酰胺能在藥品濃度超過10mM，處理時間超過12h時會使細胞形態(tài)

3、發(fā)生變化，結(jié)合雙重染色的方法得出丙烯酰胺在12h及以上處理條件下，在超過5mM時則既有一定的抑制分裂作用，還有一定的細胞致死作用;通過轉(zhuǎn)錄組學的分析可以得出細胞對于藥物的反應主要改變了蛋白質(zhì)組裝、MAPK途徑、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、酒精中毒和致癌性等功能并找到一些潛在的生物標志物用以快速監(jiān)控;建立了一套UPLC-MS在細胞基質(zhì)中的分析化學檢測方法，可以快速有效的對真正侵入人體、對人體起作用的丙烯酰胺暴露量進行檢測，而不是傳統(tǒng)單純的丙烯酰胺攝入