微針電致孔作用下siRNA的透皮給藥研究.pdf

1、對(duì)于DNA或siRNA等生物大分子藥物的透皮給藥，角質(zhì)層和細(xì)胞膜是藥物進(jìn)入皮內(nèi)靶細(xì)胞的主要障礙,為此,我們?cè)O(shè)計(jì)了一個(gè)新的微針電致孔裝置，它由兩個(gè)電極組成,作用時(shí)一極穿過(guò)角質(zhì)層，另一極通過(guò)銅芯作用在皮膚的表面。這個(gè)設(shè)計(jì)可以幫助小干擾RNA或DNA在透皮過(guò)程中透過(guò)角質(zhì)層，以便于進(jìn)行疾病的透皮治療。在這項(xiàng)研究中,我們選擇了位于皮膚基底層的黑色素細(xì)胞作為我們的靶細(xì)胞，由于MITF基因是黑色素形成過(guò)程中重要的調(diào)控基因，我們希望在微針電致孔的作用下

2、導(dǎo)入MITF-siRNA，通過(guò)抑制該基因的表達(dá)而抑制黑色素蛋白的表達(dá)，進(jìn)而探討其美白作用或者黑色素瘤的治療作用。
　　首先，我們?cè)O(shè)計(jì)并組裝了微針電致孔裝置。同時(shí)，我們從文獻(xiàn)中選擇了針對(duì)MITF基因有效的siRNA序列并加以驗(yàn)證。結(jié)合在體的疼痛實(shí)驗(yàn)、離體透皮實(shí)驗(yàn)、以及石蠟切片等實(shí)驗(yàn)結(jié)果優(yōu)化了裝置的參數(shù)。在藥效實(shí)驗(yàn)中，我們將小鼠分成了三組，分別為對(duì)照組、給藥組及微針電致孔作用下的給藥組，進(jìn)行了透皮給藥，利用定量PCR、蛋白免疫印跡、免