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1、小米不僅是主要雜糧之一,而且富含多種生物活性物質(zhì),特別是酚類化合物。小米中不溶性結(jié)合型化合物與植物細(xì)胞壁材料結(jié)合而難以直接提取出來(lái),有關(guān)小米中酚類化合物的研究大都集中在游離型粗提物及其抗氧化活性方面,許多研究認(rèn)為長(zhǎng)時(shí)間的提取和使用精細(xì)的粉末能夠確保提取到大部分化合物,這些研究由于沒(méi)有考慮結(jié)合型化合物而低估了小米中酚類化合物的總量,而小米中的結(jié)合型酚類單體化合物及其結(jié)構(gòu)鑒定尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究對(duì)小米中的結(jié)合型化合物進(jìn)行分離鑒定,初步評(píng)價(jià)了這
2、些化合物的抗氧化活性,以期為小米的深加工與產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)。
建立了小米結(jié)合型酚類化合物的提取工藝并優(yōu)化了參數(shù)。以酚類物質(zhì)含量為指標(biāo),在單因素的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)曲面試驗(yàn)優(yōu)化了小米結(jié)合酚的堿降解條件,得到了最佳參數(shù):降解時(shí)間5h,料液比1∶15,溫度67℃,氫氧化鈉濃度5 mol/L,所得多酚含量為9.297μM GAE/g沒(méi)食子酸當(dāng)量。
小米結(jié)合型酚類單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定。利用有機(jī)試劑去除小米游離型化合物后,所剩
3、殘?jiān)捎蒙鲜鰞?yōu)化參數(shù)進(jìn)行堿降解,利用有機(jī)試劑萃取降解液,得到富含結(jié)合型化合物的粗提物。采用有機(jī)溶劑萃取、減壓過(guò)濾、真空濃縮、多種柱層析純化包括減壓硅膠柱層析、常壓硅膠柱層析和凝膠柱層析Sephadex LH-20等得到4個(gè)單體酚類化合物。利用質(zhì)譜(MS)和核磁共振(1D-NMR,1H-、13C-、DEPT和2D-NMR,HMQC、HMBC、NOSY)技術(shù),并結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對(duì)比將這些化合物的結(jié)構(gòu)鑒定為:(1)反式阿魏酸,(2)反式阿魏酸甲酯
4、,(3)順式阿魏酸,(4)順式阿魏酸甲酯,其中,化合物2~4為首次從小米中分離鑒定得到。
小米結(jié)合型酚類單體化合物的抗氧化活性評(píng)價(jià)。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除法,初步評(píng)價(jià)了單體化合物的抗氧化活性。結(jié)果表明:與陽(yáng)性對(duì)照VE相比(IC50,23.12μM),化合物1-4均具有較強(qiáng)的DPPH清除能力,IC50值分別是17.19μM,26.48μ
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