肝炎肝郁脾虛證動物模型綜合藥效評價(jià)指 標(biāo)的建立.pdf

1、目的：通過皮下注射四氯化碳、慢性束縛嘗試建立肝郁脾虛證模型，并用經(jīng)典治療藥逍遙丸化裁方對該模型進(jìn)行干預(yù)，初步形成慢性肝炎肝郁脾虛證的建立方法，形成綜合藥效評價(jià)指標(biāo)。
　　方法：成年雄性大鼠32只，體重250g－300g。購入大鼠后適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，分為A（空白組）,B（模型組）,C（逍遙丸化裁方組）三組?？瞻捉M8只其余每組12只，除A組大鼠外，其余24只大鼠均按0.5ml/100g體重皮下注射10％CCL4豆油溶液，首次劑量加倍，

2、每周注射2次，共四周。第四周從模型組中任選兩只大鼠測 ALT、AST來確定肝損傷的程度。開始造模一周后，以慢性束縛方法制作慢性應(yīng)激大鼠模型,將 B、C組大鼠束縛于束縛筒內(nèi)，放入飼養(yǎng)箱中,每日3h,早8點(diǎn)到11點(diǎn),連續(xù)21d。A組不予束縛,但于相同時(shí)間點(diǎn)禁食,放置于各自飼養(yǎng)箱中3h/d,連續(xù)21d。C組大鼠在實(shí)驗(yàn)開始1周后，每次開始束縛前30 min給各組大鼠灌胃給藥，1次/d,共用3周。（以人用藥量的30倍作為大鼠給藥的逍遙丸化裁方組，

3、灌胃容積為20 mL/kg體重）。A組則分別灌服同等換算體積的蒸餾水。觀察實(shí)驗(yàn)動物的情緒行為、日飲用量、大便溏薄觀察、自主活動能力。給藥后每周灌服D-木糖接取尿液檢測尿液中D-木糖排泄率。檢測血清中5-羥色胺(5-HT)、去甲腎上腺素(NE)、多巴胺（DA）水平，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）的水平，血漿生長抑素（SS）、胃動素（MTL）、血管活性腸肽（VIP）的水平，總膽紅素（TBILI）、直接膽紅素（DBI

4、LI）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）的變化，白介素-2、6、8的水平。觀察肝臟病理變化。所有指標(biāo)進(jìn)行組間t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　結(jié)果：行為學(xué)指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)動物出現(xiàn)便溏、飲食飲水量減少、暴躁易怒、體重降低等癥狀。逍遙丸化裁方組與模型組比較，肝臟、脾臟、腎上腺指數(shù)降低。生化指標(biāo)顯示與模型組比較：1.空白組、逍遙丸化裁方組尿液中D-木糖的含量低于模型組。2.5-HT含量升高（P<0.05），DA明顯升高（P<0.01），NE含量又降低趨

5、勢。3.血清中ALT和AST的水平明顯低于模型組（P<0.05）。4. ALB明顯升高（P＜0.001）、DBLI有降低趨勢、TP明顯升高（P＜0.05），TBILI各組間無明顯差異。5. MTL明顯升高（P＜0.05）、VIP顯著升高（P＜0.001）、SS升高（P＜0.05）。6. IL-2降低（P＜0.05）、IL-6降低、IL-8降低。7.空白組肝組織結(jié)構(gòu)正常，模型組肝小葉結(jié)構(gòu)不清，可見明顯的片狀壞死，伴有炎癥細(xì)胞浸潤。逍遙丸組