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文檔簡介
1、本文以提取蛋黃卵磷脂和蛋黃油后的鴨蛋黃蛋白為原料,研究鹽水浸提法對卵黃高磷蛋白提取效果的影響,確定氯化鈉溶液提取卵黃高磷蛋白的工藝參數(shù);研究過氧乙酸對鴨蛋黃蛋白的處理效果,確定適宜的過氧乙酸預處理工藝;在過氧乙酸預處理的基礎上,研究六種商品化蛋白酶:胰蛋白酶、中性蛋白酶、風味酶、堿性蛋白酶、動物蛋白水解酶、木瓜蛋白酶對鴨蛋黃蛋白的酶解效果,篩選出適合鴨蛋黃蛋白水解的較佳用酶,采用多酶分步水解法,考察不同的酶組合對鴨蛋黃蛋白的水解效果,確
2、定適宜的多酶水解工藝條件;以鴨蛋黃蛋白酶解多肽液和無水氯化鈣為原料,研究濕法螯合條件對鈣螯合率的影響,確定鴨蛋黃蛋白酶解多肽液與無水氯化鈣的最適螯合條件,并利用無水乙醇沉淀制備鴨蛋黃蛋白肽螯合鈣。主要研究結果如下:
1.以鴨蛋黃蛋白為原料,采用氯化鈉溶液提取卵黃高磷蛋白,設計四因素三水平的響應面優(yōu)化試驗,確定了卵黃高磷蛋白的最佳提取工藝為:氯化鈉濃度12%,提取時間5h/次,洗滌次數(shù)5次,液料比12∶1;在此條件下,卵黃高磷蛋
3、白得率的理論極值為5.47%。卵黃高磷蛋白的得率為5.27%,提取率為88.16%。
2.以鴨蛋黃蛋白為原料,過氧乙酸對鴨蛋黃蛋白進行了預處理。采用多指標綜合評分法,確定了過氧乙酸預處理的最佳工藝條件:過氧乙酸濃度0.2%,處理時間40min,底物濃度5%,處理溫度50℃。
3.研究了鴨蛋黃蛋白水解的蛋白酶篩選與復配。以水解度為指標,篩選出了適合于酶法制備鴨蛋黃蛋白多肽的蛋白酶:中性蛋白酶、堿性蛋白酶和風味酶。
4、> 試驗以水解度為指標,通過單因素和正交試驗設計,優(yōu)化出了單酶水解工藝:中性蛋白酶:底物濃度為5%,酶添加量為0.8%,水解時間為7h,pH值為7.0,水解溫度為50℃,在此條件下,水解度可達54.38%;堿性蛋白酶:底物濃度為5%,酶添加量為1.2%,水解時間為12h,pH值為9.5,水解溫度為55℃,在此條件下對鴨蛋黃蛋白進行水解,水解度可達58.18%;風味酶:底物濃度5%,酶添加量2.1%,水解時間12h,pH值為7.0,水解
5、溫度為50℃,在此條件下,水解度可達33.41%。
以水解度和水解液氮得率為指標,研究了中性蛋白酶+風味酶,堿性蛋白酶+風味酶,中性蛋白酶+堿性蛋白酶,堿性蛋白酶+中性蛋白酶,中性蛋白酶+堿性蛋白酶+風味酶,堿性蛋白酶+中性蛋白酶+風味酶6種蛋白酶組合對鴨蛋黃蛋白的酶解效果,篩選出了中性蛋白酶+堿性蛋白酶+風味酶作為最佳蛋白酶組合,即水解工藝為:底物濃度為5%,中性蛋白酶在酶添加量為0.8%,pH值為7.0,水解溫度為50℃條
6、件下,水解7h,然后調節(jié)pH9.5,在堿性蛋白酶:酶添加量為1.2%, pH值為9.5,水解溫度為55℃條件下,水解12h,最后調節(jié)pH7.0,在風味酶:酶添加量2.1%, pH值為7.0,水解溫度為50℃條件下,水解12h。在此條件下,水解度可達85.84%,水解液氮得率可達91.62%。通過對其水解產物肽分子量的分布的研究,發(fā)現(xiàn)水解產物中至少有8種不同分子量的肽類物質,相對分子質量均在10000Da以下,分子量低于3196Da的短肽
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