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1、分類號Q93335學校代碼10129UDC579學號2010209011牛乳金黃色葡萄球菌生物被膜多糖的提取及其免疫原性的研究StudyTheExtractionofBPTheImmunogenicityofConjugateinBPfromStaphylococcusAureus申請人:王美仁學科門類:工學學科專業(yè):食品科學研究方向:食品微生物指導教師:殷文政教授論文提交日期:二〇一三年六月StudytheExtractionofBP
2、theImmunogenicityofConjugateinBPfromStaphylococcusAureusAbstractOneofthekeypathogenicbacteriacausingcowmastitisclinicalinfectionfoodpoisoningisstaphylococcusaureusalongtimethepathogeninfectiontreatmentmainlyantibioticsho
3、weveralargenumberofpersistentantibioticusecanleadtothefmationofbacteriaresistantstrainsthepreventiontreatmentofincreaseddifficulty.Milkthepresenceofstaphylococcusaureusresistantstrainscanalsoleadtohugehiddendangertofoods
4、afetytherefetostaphylococcusaureusresistantstrainbiofilmimmunogenicityasthebreakthroughpointtocarryouttheresearchtoexpleruyuanstaphylococcusaureusprovidesthereferenceftherapiddetectionmethodsofdrugresistantstrains.Thiste
5、stisindertotakethestaphylococcusaureusinmilkresistantstrainsftargetbacteriaresearchinTSBliquidmediumaddeddifferentnutrientcompositionbyobservationoflivebacteriacountingthegrowthofbiofilmstaphylococcusaureuscreatureistouc
6、hofcultureconditionswereoptimized.Aftercultureofmaturebiofilmofstaphylococcusaureusultrasonicoscillationelutionhasgoodbiofilmwithanhydrousethanolprecipitationonthebiofilmpolysacideextractionusingenzymaticglucancellulosec
7、olumnchromatographyultrafiltrationconcentrationbybiofilmtoextractcrudepolysacideffurtherpurificationatthesametimeusingconventionalmethod(phenolsulfuricacidmethod)determinethecontentofpolysacide.Finallyusinggoodbiofilmwer
8、epurifiedpolysacideimmuneBalBcmiceatthesametimebyindirectELISAmethodevaluatetheserumimmuneeffect.Experimentalresultsshowedthatstaphylococcusaureusbiofilmpolysacideinwith1%lactose2%NaCl6%fetalbovineserumliquidstrongestgro
9、wthfceinTSBculturemedium.Withthisconditiondeveloppolysacideextractionpurificationofbiofilmthepurityoftherawsugaris13.99﹪thepurityofpurifiedpolysacidewas69.05﹪.Thenucleicacidcontentis0.1109mgmL0.0247mgmLprotein.Biofilmofp
10、urifiedpolysacideimmuneBalBcmicenmalsalineinjectionasanegativecontrolgrouptheresultsshowedthatbiofilmpurifiedpolysacidedidnotstimulatetheanimalsimmuneresponsedidntproducebiofilmpolysacidespecificityantibodyjustaswiththei
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