纖維堆囊菌發(fā)酵過程中所用消泡劑的篩選及作用機(jī)理的研究.pdf

1、埃博霉素是一類具有抗微管蛋白聚合的抗腫瘤藥物。最初在粘細(xì)菌纖維堆囊菌的次級代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)。其中，埃博霉素A，B最初在S.Cellulosum So ce90發(fā)現(xiàn)，并鑒定為16元大環(huán)內(nèi)酯類化合物。相對于紫杉醇來說，其毒副作用小，結(jié)構(gòu)相對簡單，更易溶于水，是一種應(yīng)用前景廣闊的廣譜抗癌藥物。目前纖維堆囊菌已可以通過液體深層發(fā)酵，但是發(fā)酵過程產(chǎn)生過多的泡沫。泡沫可通過物理機(jī)械方法和化學(xué)消泡劑來控制。其中化學(xué)消泡劑以其操作簡單，成本低廉，耗能少而

2、得到應(yīng)用廣泛。但是消泡劑的添加往往是在沒有充分了解的情況下添加到發(fā)酵過程中，對菌體生長的影響考慮較少。
　　本文選擇了4種天然油脂消泡劑和8種化學(xué)消泡劑。分別比較了消泡抑泡能力以及對菌體生長的影響。通過測定培養(yǎng)基中蛋白質(zhì)含量，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵培養(yǎng)基中含有較高的蛋白質(zhì)含量(91.6μg/mL)，這是其容易起泡的原因之一。當(dāng)M26培養(yǎng)基中添加0.10％的SXP107有機(jī)硅聚醚復(fù)合消泡劑時(shí)，可以提高19%的菌體量，因此作為種子培養(yǎng)基的消泡劑。添

3、加0.10%的磷酸三丁酯和0.06%THIX-298聚醚改性硅油能顯著提高埃博霉素 A/B，分別為31.41%/18.05%和48.12%/48.55%。SXP107有機(jī)硅聚醚復(fù)合消泡劑雖然對埃博霉素產(chǎn)量提高不大，但是其消泡抑泡能力顯著。綜合考慮消泡劑的消泡能力及對菌體和埃博霉素產(chǎn)量的影響，初步選擇磷酸三丁酯，聚醚改性硅油和SXP107有機(jī)硅聚醚復(fù)合消泡劑作為發(fā)酵培養(yǎng)基的消泡劑。
　　為進(jìn)一步了解消泡劑對菌體的影響，研究了SXP1

4、07，TBP，THIX-298消泡劑對pH，氨基氮和還原糖變化的影響以及對菌體量和埃博霉素產(chǎn)量的影響，同時(shí)研究了α-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體的酶活受兩種消泡劑的影響。發(fā)現(xiàn)在M26培養(yǎng)基中，添加SXP107消泡劑提高了菌體利用營養(yǎng)物質(zhì)的能力。在發(fā)酵培養(yǎng)基中，THIX-298消泡劑的添加也使得菌體利用碳源氮源的能力增強(qiáng)，而TBP消泡劑對其影響不大。同時(shí)OGDHC酶活受到THIX-298的影響較TBP高。
　　發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)比較了消泡劑的多個(gè)參