纖維堆囊菌菌株的分子鑒別及埃博霉素合成酶基因的克隆.pdf_第1頁
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1、該論文的研究工作主要分為兩個(gè)部分:1)纖維堆囊菌菌株的分子鑒定,該文對(duì)10株溶纖維素粘細(xì)菌的ISR(16-23S rDNA間區(qū))進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,結(jié)果明確指出了溶纖維素粘細(xì)菌的rRNA操縱子數(shù)目和ISRs的序列信息,并證實(shí)了ISRs作為區(qū)分密切相關(guān)粘細(xì)菌菌株工具的有效性.2)埃博霉素合成酶基因的克隆分析,粘細(xì)菌可產(chǎn)生大量的次級(jí)代謝產(chǎn)物,其中,由纖維堆囊菌產(chǎn)生的聚酮類化合物埃博霉素是一種強(qiáng)的抗癌物質(zhì),具有巨大藥用開發(fā)潛力.目前已報(bào)道了埃博

2、霉素基因簇的組成.埃博霉素是由I型PKS(聚酮合酶)和NRPS(非核糖體肽合成酶)雜合基因簇合成的.埃博霉素PKS基因簇是多功能酶,以模塊形式組織.每個(gè)模塊負(fù)責(zé)一個(gè)二碳單元的衍生步驟.我們提取了纖維堆囊菌的染色體組DNA,并通過PFGE確定了DNA片段的大小.根據(jù)埃博霉素合成酶基因的序列信息,我們?cè)O(shè)計(jì)了相應(yīng)于epoA KSQ和epoB PCP的兩種探針,并對(duì)構(gòu)建的文庫(kù)采用噬菌斑雜交法篩選埃博霉素基因簇.對(duì)這四個(gè)重組噬菌體提取DNA,用S

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