RST抗腫瘤活性成分篩選及其脂質體研究.pdf

1、RST總提取物具有抗心律失常、抗腫瘤、免疫抑制、抗氧化和鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、解熱降溫等中樞抑制性作用。近幾年關于RST提取液對多種腫瘤細胞有抑制作用而對正常細胞無毒副作用的相關文獻報道越來越多，然而對于RST提取液抗腫瘤的活性成分報道很少。
　　 本課題組在前期工作中首次構建了TrkA脂筏.硅膠固定相色譜系統(tǒng)，固定相能與酪氨酸激酶受體為靶點的藥物特異性結合產生保留，而非酪氨酸激酶靶點藥物在該TrkA脂筏色譜柱中無保留行為，因此可以用于以T

2、rkA受體為靶標的先導藥物篩選研究。前期研究發(fā)現RST提取液在脂筏色譜上有特異性的保留，推測RST提取液含有相關的抗腫瘤活性成分。
　　 本研究以MTT法為篩選指標，以U251為受試細胞，因為其細胞內富含TrkA。采用體外抗腫瘤活性跟蹤與化學分離相結合的方法，確定了RST的部分抗腫瘤活性成分，并對活性成分進行了脂質體的制劑研究。
　　 采用80％乙醇對RST藥材進行提取，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，得到不同部

3、位萃取物，抗腫瘤活性測定顯示:石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、剩余水溶性部位均有一定的抗腫瘤作用，其中乙酸乙酯部位的抗腫瘤作用最好，因此確定RST提取物的乙酸乙酯萃取層為抗腫瘤活性部位，同時這樣的結果也驗證了脂筏色譜對于RST提取液的活性篩選結果的可靠的。
　　 取RST水提取液的乙酸乙酯萃取層進行分離、純化。從活性部位中分離得到3個化合物，經理化性質和核磁共振譜圖分析，分別鑒定為:肉豆蔻烯酸乙酯、肉豆蔻烯酸、山槐素，其中肉豆蔻烯酸乙

4、酯、肉豆蔻烯酸為首次從RST中分離得到。采用MTT法對以上3個化合物進行抗腫瘤活性驗證。結果表明三個化合物都對U251腫瘤細胞具有抑制作用，其中山槐素的抑制效果最強。
　　 通過以上研究發(fā)現，MCC具有明顯的抗腫瘤作用，但其水溶性低，生物利用度低，針對這樣的問題將其制備成脂質體。采用薄膜分散法制備脂質體，超濾法測定脂質體包封率，以包封率、載藥量為指標，利用星點設計優(yōu)化了處方及工藝。根據優(yōu)化處方工藝制得脂質體的包封率為(83.95