產(chǎn)木聚糖酶菌株的篩選、酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)的研究.pdf

1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：編號(hào)：20110809050217碩士學(xué)位論文產(chǎn)木聚糖酶菌株的篩選、酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)的研究ScreeningofXylanaseProducingStrainsPurificationacterizationofXylanase指導(dǎo)教師：指導(dǎo)教師：申請(qǐng)人姓名：申請(qǐng)人姓名：學(xué)科專業(yè)名稱：學(xué)科專業(yè)名稱：研究方向：研究方向：培養(yǎng)單位：培養(yǎng)單位：謝占玲謝占玲教授教授動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)

2、科學(xué)院青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院飼料資源的開發(fā)和利用飼料資源的開發(fā)和利用戚永躍戚永躍2011年05月.I摘要對(duì)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)木聚糖酶的4個(gè)屬的10株真菌進(jìn)行篩選，得到一株具有高效木聚糖降解能力的菌株50647。通過ITS序列分析，并結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定確定其屬于擬盤多毛孢屬。該菌以燕麥秸稈粉和麩皮不溶性木聚糖作為碳源，于25℃條件下，120rmin搖瓶光照培養(yǎng)，第3天發(fā)酵液中木聚糖酶活力達(dá)到峰值為49.3Uml，酶的比活力為1066.2Umg。培養(yǎng)第9

3、天后發(fā)酵液中木聚糖酶酶活力為34.3Uml，是酶活力峰值的70%左右。SDSPAGE及酶譜分析表明該菌能夠產(chǎn)生6種不同分子量大小的木聚糖酶組分，分別定義為組分A、B、C、D、E、F。其中組分A屬于低分子量木聚糖酶，其他木聚糖酶組分均屬于高分子量木聚糖酶。采用硫酸銨分級(jí)沉淀，兩步SephacrylS100凝膠過濾層析和DEAESepharoseFastFlow離子交換層析等方法從50647菌株的粗酶液中分離得到一種低分子量木聚糖酶XYLA

4、。經(jīng)SDSPAGE檢測(cè)達(dá)到電泳純，其相對(duì)分子質(zhì)量為20.6KDa。在整個(gè)純化過程中，XYLA的純化倍數(shù)為28.1，回收率為2.0。木聚糖酶酶學(xué)性質(zhì)表明，XYLA的最適反應(yīng)pH和溫度分別為pH5.5和40℃在pH56的范圍內(nèi)具有很好的穩(wěn)定性，XYLA的在40℃以下穩(wěn)定性很好，超過40℃酶活力迅速降低。金屬離子Mn2、Na、K對(duì)木聚糖酶XYLA有激活作用，F(xiàn)e2在4mM條件下對(duì)該酶具有一定的抑制作用，而Hg則完全抑制木聚糖酶的酶活性。XYL