酶法合成EPA、DHA甘油三酯的研究.pdf

1、本研究對富含二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的甘油酯型產(chǎn)品的酶法合成進行了系統(tǒng)研究,主要目的是利用全酶法合成高EPA、DHA含量的甘油三酯產(chǎn)品。以精煉天然魚油為起始原料,本研究利用固定化脂肪酶LipozymeRMIM為催化劑,通過填充床酶反應器的催化方式將天然魚油部分醇解,進行EPA和DHA的富集;將收集到的魚油醇解產(chǎn)物通過串聯(lián)的三級分子蒸餾處理,得到了EPA和DHA含量較高的甘油酯型產(chǎn)品,EPA和 DHA的含量由初始的

2、18.1％、12.3%,上升到了31.3%、22.4%。分子蒸餾同時實現(xiàn)了副產(chǎn)物乙酯中EPA和DHA的回收和初步濃縮(EPA26.7%, DHA18.1%),將乙酯經(jīng)尿素包合純化后EPA可以達到41.8%,DHA可以達到31.1%。由于脂肪酸乙酯與混合甘油酯(含有大量甘油二酯和單甘油酯)具有良好的互溶性,本研究可以在無溶劑體中利用固定化脂肪酶催化濃縮魚油乙酯和混合甘油酯進行酯交換反應合成富含EPA和DHA的甘油三酯。通過單因素實驗確定了

3、較適宜的工藝參數(shù):在底物摩爾比(濃縮魚油乙酯/甘油酯游離羥基)為1:1時,選擇固定化脂肪酶Novozym435為催化劑,反應溫度為60℃,Novozym435的添加量為底物混合物的2%。依此條件組合進行酯交換試驗,產(chǎn)物經(jīng)分子蒸餾分離后得到的甘油酯中甘油三酯的含量可以達到82.3%,基本不含有單甘油酯(0.2%);甘油酯中的EPA和DHA含量分別可以達到40.4%和28.6%。將甘油酯混合物與乙酯分離,收集混合甘油酯,利用偏甘油酯脂肪酶

4、Lipase G50選擇性地水解混合甘油酯中的甘油二酯,以達到純化甘油酯中甘油三酯的目的。從單因素分析看,在水分含量為20%~100%, pH為4~6.5,溫度為20℃~45℃間的范圍條件下水解反應都能發(fā)生,其最合適的水解條件為pH6.0,溫度40℃,水分含量60%。在單因素分析的基礎上,綜合考慮水分含量、溫度和pH值3個因素對水解反應的影響,采用響應面分析方法,得到了水解反應模型,。實驗結(jié)果表明,水解反應的最優(yōu)條件為:水分含量57.6