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1、鏈霉菌次級(jí)代謝產(chǎn)物非常豐富,其內(nèi)存在大量沉默的次級(jí)代謝產(chǎn)物生物合成基因簇,激活這些沉默基因簇往往產(chǎn)生活性天然產(chǎn)物,這已成為新藥候選化合物的重要來源。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),我們自行選育獲得的恰塔努加鏈霉菌L10中存在32個(gè)隱性基因簇,其中一個(gè)為角蒽酮類基因簇(cha),過表達(dá)cha簇內(nèi)正調(diào)控基因chaI成功激活了該簇并合成了新的角葸酮化合物—恰塔霉素A(Chattamycin A,CtA)、恰塔霉素B(Chattamycin B,CtB)。
2、細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)表明CtB具有較好的抗腫瘤細(xì)胞增殖活性和抗細(xì)菌活性。
本論文針對(duì)cha簇內(nèi)另一個(gè)途徑特異性調(diào)控蛋白ChaK,進(jìn)行了深入的調(diào)控機(jī)制研究。研究表明,ChaK在chaJ(編碼轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)啟動(dòng)子上有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn),ChaK負(fù)調(diào)控chaJ轉(zhuǎn)錄;另外,恰塔霉素CtB累積到一定濃度,能夠與ChaK結(jié)合解除其對(duì)chaJ的抑制,轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)上升;ChaK蛋白在自身啟動(dòng)子上有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn),qRT-PCR實(shí)驗(yàn)表明ChaK能進(jìn)行自我反饋抑制。
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