恰塔努加鏈霉菌中納他霉素轉(zhuǎn)運(yùn)網(wǎng)絡(luò)及其調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、鏈霉菌能產(chǎn)生大量具有重要醫(yī)療和商業(yè)價(jià)值的天然產(chǎn)物，其中包括了大部分抗生素?？股貙?duì)于產(chǎn)生菌普遍具有自身毒性，鏈霉菌為抵抗所合成藥物對(duì)自身的傷害，進(jìn)化出多種自身耐藥機(jī)制，藥物外排是其中一種十分重要的機(jī)制。近年來(lái)抗生素的合成、調(diào)控、后修飾機(jī)制都得到了深入解析，而抗生素轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的研究仍然處于起步階段。本文以一株自行篩選的納他霉素高產(chǎn)工業(yè)菌L10為研究對(duì)象，深入解析了納他霉素及其合成前體的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制和相關(guān)調(diào)控應(yīng)答機(jī)制。
　　首先，論文證實(shí)納

2、他霉素合成基因簇內(nèi)的兩個(gè)Ⅲ型ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ScnA和ScnB參與了納他霉素轉(zhuǎn)運(yùn)，且ScnA和ScnB能夠分別形成同源二聚體行使納他霉素轉(zhuǎn)運(yùn)功能。除ScnA和ScnB外，我們利用表達(dá)譜芯片篩選出Mfs1、NepⅠ/NepⅡ這2組轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，其中Mfs1編碼了主要協(xié)助轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族蛋白;NepⅠ/NepⅡ共同編碼了Ⅰ型ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:Mfs1與NepⅠ/Ⅱ能夠與ScnA、ScnB協(xié)同作用，共同構(gòu)成納他霉素高效轉(zhuǎn)運(yùn)網(wǎng)絡(luò)。進(jìn)一步研究

3、發(fā)現(xiàn)，ScnA/B、Mfs1還能夠識(shí)別和轉(zhuǎn)運(yùn)納他霉素合成直接前體4.5-脫環(huán)氧納他霉素。另外，進(jìn)化分析結(jié)果表明存在于抗生素合成基因簇外基因編碼的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可能是廣泛存在的鏈霉菌中的一種自身耐藥機(jī)制。
　　其次，論文系統(tǒng)研究了納他霉素轉(zhuǎn)運(yùn)網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控機(jī)制，研究結(jié)果表明，scnA/B受途徑特異性調(diào)控因子ScnRⅡ正調(diào)控，mfs1受TetR家族調(diào)控因子Mfo1負(fù)調(diào)控。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)納他霉素或其前體累積時(shí)， Mfo1會(huì)應(yīng)答這種累積，啟動(dòng)Mfs1