肝癌特異性結(jié)合肽篩選及合成的實驗研究.pdf_第1頁
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1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文肝癌特異性結(jié)合肽篩選及合成的實驗研究姓名：朱小華申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：吳華2003.4.1華中科技大學(xué)嗣濟醫(yī)學(xué)院禧士學(xué)位論文ABSTRACTObjective：Thepresentstudywasperformedtoscreenandisolatehomingpeptidesthatbindspecifically，orpreferentially，tohepatocarcinoma

2、cellsusingphagedisplayofrandompeptidelibrariesandwholecellpanningtechniquewiththepurposeofdevelopinganewpeptidewhichmaybeusedasthecarrierindiagnosticimagingordrug—targetdeliveryMethods：Apeptide12一merphagedisplay1ibrarywa

3、susedtoisolatepeptidethatbindtohumanhepatocarcinomacell，andfourroundssubtractivepanningwerecarriedoutwiththehumanhepatocarcinomacell1ineHepG2asthetargetTheaffinitiesofselectedphageclonestohumanhepatocarcinomacellweredete

4、rminedwithELISAandcomparedwithhumaniivercellandothertumorcellSrespectivelyThesinglestrandedDNAofphagesthatbindhumanhepatocarcinomacellspecificallywereextractedandpurified，thentheiraminoacidsequenceswerededucedthoughDNAse

5、quencingInaddition，imunofluorescenceanalysisbyconfocal1ightmicroscopywasperformedtoobservethebindingsiteA16merpeptide(1】|IHl6)wassynthesizedaccordingtotheDNAsequenceresultsItwaspurifiedbyreverse—phasehigh—performanceliqu

6、idchromatographyMassspectrometrywasusedtoconfirmthepredictedmaSSThebindingabilityofWIll6WaSdeterminedwithcompetitiveinhibitiontestResults：Afterfourroundspanning，thephagethatboundtoandinternalizedinhumanhepatocarcinomacel

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