基于功能化納米金的信號(hào)放大構(gòu)建蛋白激酶活性分析傳感.pdf

1、蛋白質(zhì)磷酸化修飾是一種重要的蛋白質(zhì)的翻譯后修飾，是生命體中普遍存在的一種調(diào)節(jié)方式。尤其是通過(guò)激酶調(diào)節(jié)的蛋白磷酸化在大多數(shù)的生物過(guò)程中起到重要的調(diào)節(jié)作用。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的正常磷酸化調(diào)節(jié)發(fā)生異常以及激酶過(guò)度表達(dá)時(shí)，便會(huì)導(dǎo)致癌癥，糖尿病，心臟病等各種疾病的發(fā)生。由于蛋白質(zhì)磷酸化過(guò)程是動(dòng)態(tài)的，并且磷酸化肽段或蛋白在生物樣品中的含量較低，因此高靈敏蛋白磷酸化分析面臨著巨大的挑戰(zhàn)，它對(duì)于疾病的早期快速診斷、藥物篩選和治療等方面具有重大的意義。
　　

2、電化學(xué)傳感器具有靈敏性好、儀器簡(jiǎn)單并且易于操作、可控性能好、及易于微型化等特點(diǎn)，一直受到大家的高度關(guān)注。隨著信號(hào)放大技術(shù)、納米技術(shù)的不斷發(fā)展，結(jié)合納米技術(shù)和信號(hào)放大技術(shù)的電化學(xué)傳感器越來(lái)越多的被應(yīng)用在分析領(lǐng)域。在本論文中，我們研究了具有大的比表面、強(qiáng)的導(dǎo)電性和生物相容性貴金屬納米材料及其復(fù)合材料的制備、電化學(xué)傳感器的構(gòu)建及其在蛋白激酶活性分析中的應(yīng)用。
　　構(gòu)建了DNA-AuNPs的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，通過(guò)提供豐富的位點(diǎn)以吸附大量的RuHe

3、x，極大的增強(qiáng)了電化學(xué)檢測(cè)的信號(hào)，用于蛋白激酶活性的超靈敏檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該傳感器具有低的檢測(cè)限、較寬的線性范圍等優(yōu)勢(shì)。該傳感器也可應(yīng)用于蛋白激酶抑制劑的分析，通過(guò)兩種不同的抑制劑的電化學(xué)響應(yīng)，可知該傳感器可成功的應(yīng)用于激酶抑制劑的篩選。最后，我們將該設(shè)計(jì)應(yīng)用于不同細(xì)胞的裂解液中蛋白激酶的活性分析，結(jié)果驗(yàn)證該傳感器在實(shí)際樣品中實(shí)施的可行性。
　　設(shè)計(jì)了一種新型的電化學(xué)發(fā)光生物傳感器，以蛋白激酶PKA為模型化合物，實(shí)現(xiàn)了對(duì)蛋白激