竹子精華水的成分分析及生物學(xué)活性研究.pdf

1、竹茹，為禾本科竹亞科中青稈竹、大頭典竹或淡竹等的莖稈外皮層或次其層，是一種常用的中藥材，具有多種藥理活性。竹子精華水(WEBS)是竹茹超臨界CO2流體萃取時(shí)得到的水分級(jí)相，性質(zhì)穩(wěn)定。本文以WEBS為研究對(duì)象，首先采用氯仿，乙酸乙酯、正丁醇等有機(jī)溶劑分步萃取其中的有效成分，進(jìn)行定性和定量分析；利用瓊脂平板擴(kuò)散法研究WEBS對(duì)常見食品腐敗菌的抑菌能力，同時(shí)分析其抑菌成分，并觀察常規(guī)加熱處理方法對(duì)其抑菌性能的影響；采用體外無(wú)細(xì)胞系和黑色素B1

2、6細(xì)胞兩種體系評(píng)價(jià)了WEBS的美白作用及機(jī)制；以熊果苷和市售防曬化妝品為參考研究了WEBS的抗紫外輻射性能；最后對(duì)WEBS的皮膚和粘膜安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，現(xiàn)將主要結(jié)果歸納如下：
　　 (1)竹子精華水(WEBS)中總黃酮、內(nèi)酯、酚酸、總糖和葸醌類化合物的含量分別為0.24 mg/mL，3.65 mg/mL，0.20 mg/mL，0.80 mg/mL和5.18μg/mL；檢測(cè)出揮發(fā)性化合物28種，主要是醛，醇、呋喃、酮類和酚類，C6

3、-C8中等鏈長(zhǎng)的含氧化合物占主導(dǎo)地位。
　　 (2)利用瓊脂平板擴(kuò)散法研究了WEBS對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉、桔青霉菌、啤酒酵母的抑制作用，抑菌效果與濃度呈正相關(guān)，最小抑菌濃度(MICs)在4.9～32 mg/mL之間；對(duì)細(xì)菌的抑制作用明顯強(qiáng)于酵母和霉菌，其中對(duì)枯草芽孢桿菌的抑制效果最顯著；不同的熱處理?xiàng)l件對(duì)抑菌效果影響不大，甚至121℃、4s的超高溫瞬時(shí)處理也不影響其抑菌活性，表明WEBS中所含的抑菌成

4、分具有很好的熱穩(wěn)定性。
　　 (3)以小鼠惡性黑色素瘤細(xì)胞(B-16細(xì)胞)為受試細(xì)胞株，分別以從天然植物中提取的公認(rèn)的美白產(chǎn)品--熊果苷和化學(xué)物質(zhì)氫醌為陽(yáng)性對(duì)照，通過測(cè)定黑色素細(xì)胞的增殖率、細(xì)胞內(nèi)黑色素含量、細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性、細(xì)胞毒性以及對(duì)體外蘑菇酪氨酸酶活性的抑制等指標(biāo)，表明WEBS可以抑制B-16細(xì)胞增殖，當(dāng)受試濃度為5mg/mL時(shí)，細(xì)胞存活率為65％；對(duì)細(xì)胞酪氨酸酶的抑制率隨著試樣濃度的增加而增加，當(dāng)濃度為5mg/mL時(shí)

5、，抑制率達(dá)75.3％，優(yōu)于同濃度的熊果苷；WEBS所試濃度均能顯著降低黑色素的含量，并呈濃度依賴關(guān)系：不同濃度的WEBS對(duì)蘑菇酪氨酸酶均有一定的抑制作用，在濃度為16mg/mL時(shí)，最大抑制率為89.05％，半抑制濃度(IC50)為6mg/mL。此外，WEBS的細(xì)胞毒性低于同濃度的熊果苷和氫醌，表現(xiàn)為細(xì)胞密度降低，對(duì)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞較小。
　　 (4)WEBS對(duì)短波紫外線(295nm左右)有較強(qiáng)吸收，對(duì)長(zhǎng)波紫外線的吸收能力較弱；

6、吸收紫外線的能力在較低濃度(0.3mg/mL)時(shí)已達(dá)到防曬劑的防曬指數(shù)要求，且隨濃度的提高而增強(qiáng)。同時(shí)，可以有效保持角質(zhì)層水分含量，使水分經(jīng)皮膚散失變小，具有作為護(hù)膚因子研究開發(fā)的價(jià)值。
　　 (5)用小鼠和家兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過急性毒性試驗(yàn)、多次皮膚刺激試驗(yàn)，急性眼刺激試驗(yàn)等進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，小鼠經(jīng)口急性毒性最大耐受量，雌、雄兩性均大于5000mg/kg體重，按急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，屬于實(shí)際無(wú)毒類；家兔多次皮膚刺激性試驗(yàn)

7、中，每天每只動(dòng)物皮膚刺激反應(yīng)積分均值為0，屬于實(shí)際無(wú)刺激性；家兔急性眼刺激性試驗(yàn)中，受試物對(duì)家兔眼刺激性最高積分均值角膜、虹膜、結(jié)膜均為0，屬實(shí)際無(wú)刺激性。證明WEBS具有很高的安全性，可用于特殊用途化妝品領(lǐng)域。
　　 綜上所述，竹子精華水(WEBS)中富含黃酮、內(nèi)酯、多糖、有機(jī)酸等生物活性物質(zhì)，具有較強(qiáng)的抗菌、抑菌能力，并能通過多種途徑抑制黑色素的生成，同時(shí)有一定的防曬和保濕效果，具有作為特殊用途化妝品的功能性成分進(jìn)行開發(fā)的潛