不吸水鏈霉菌的生物活性成分分離.pdf

1、本實驗所選的研究對象是一株來自土壤的不吸水鏈霉菌。前期結果證明它具有良好的抗菌活性。同時經過初步的化學分析和檢測，表明此不吸水鏈霉菌所產生的活性物質的化學結構不同于以往在鏈霉菌中分離到的化合物。本研究利用多種色譜相結合的分離方法和波譜結構鑒定技術，對該株不吸水鏈霉菌發(fā)酵液中的抗菌活性物質進行了研究。
　　利用多種色譜相結合的方法對不吸水鏈霉菌的抗菌活性物質進行了分離和純化。首先對不吸水鏈霉菌發(fā)酵菌液采用大孔吸附樹脂AB-8進行粗分

2、，利用水-乙醇系統(tǒng)(1∶0，1∶3，2∶2，3∶1，0∶1)極性由高到低梯度洗脫，每個濃度進行5倍柱體積淋洗，將淋洗液減壓濃縮，獲得6個組分。然后依據(jù)薄層層析與抗菌活性測定結果，將75％乙醇層部分和100％乙醇層部分合并，作為主要分離部分。將其溶解后，利用中壓正相硅膠柱層析、葡聚糖凝膠SephadexLH-20柱層析、正相硅膠制備薄層層析、高壓反相硅膠柱層析等方法進行分離，獲得5個化合物。
　　不吸水鏈霉菌活性成分的結構鑒定。采用

3、波譜學技術，質譜、核磁共振氫譜、核磁共振碳譜對分離得到的化合物進行結構解析和鑒定，確定了化合物5的化學結構，分子量為353.13341，可以推斷出該化合物的分子式為C20H19NO5。
　　以革蘭氏陽性細菌枯草芽孢桿菌與革蘭氏陰性細菌花生青枯病菌為供試菌株，采用96孔板連續(xù)稀釋-MTT生物自顯影法測定化合物5的最小抑菌濃度(MIC)。結果表明，化合物5對枯草芽孢桿菌與花生青枯病菌具有較好的抗菌作用，對枯草芽孢桿菌表現(xiàn)出較強的抗菌活