中成藥肝絡(luò)欣丸中活性成分的確定和分離.pdf

1、肝絡(luò)欣丸是一種治療乙型病毒型肝炎的中成藥，由秦艽、螞蟻等二十種藥材組成。其中秦艽（G.macrophylla）包含龍膽苦苷(Gentiopicroside)、馬錢苷酸(Loganicacid)、獐牙菜苦苷(Swertimarin)等重要的天然活性成分。龍膽苦苷等三種成分因具備抗炎、保肝等多種生理活性而受到了科研學(xué)者的廣泛關(guān)注。同時(shí)秦艽中的揮發(fā)性成分據(jù)報(bào)道也具有抗炎的良好效果。
　　本文的研究目的是建立一個(gè)從泰艽中快速并大量制備出龍

2、膽苦苷、馬錢苷酸、獐牙菜苦苷的工藝。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)提取、大孔吸附樹脂純化，最后經(jīng)由反相制備色譜進(jìn)行進(jìn)一步的純化，得到高純度的活性成分，并對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。該方法在分離純化以上三種成分的同時(shí)，可以獲得另一種成分，通過(guò)結(jié)構(gòu)鑒定確定為獐牙菜苷。除此之外，我們也對(duì)秦艽中的揮發(fā)性成分進(jìn)行了初步的研究。
　　本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.優(yōu)化了龍膽苦苷、馬錢苷酸、獐牙菜苦苷三種成分同時(shí)進(jìn)行HPLC檢測(cè)的檢測(cè)條件:甲醇∶0.1％TFA=2

3、5∶75，流速1mL/min，檢測(cè)30min。三種物質(zhì)的HPLC檢測(cè)的紫外檢測(cè)波長(zhǎng)分別為243nm，241nm，238nm。此HPLC檢測(cè)條件檢測(cè)樣品準(zhǔn)確并高效。
　　2.通過(guò)三種提取方法（回流提取、超聲輔助提取和閃式提?。┑谋容^，最終確定采用超聲輔助提取法，優(yōu)化提取條件，最優(yōu)條件為甲醇提取，固液比1∶12，提取時(shí)間12h，提取兩次，最終龍膽苦苷、馬錢苷酸、獐牙菜苦苷三種成分的提取率均高于95％。
　　3.通過(guò)對(duì)沉淀析出、納

4、濾、溶劑萃取法、大孔樹脂吸附純化方法的比較。大孔吸附樹脂因其環(huán)境危害低（有機(jī)溶劑使用量?。?，產(chǎn)品回收率高，純化倍數(shù)高的優(yōu)勢(shì)，最終確定用于后續(xù)純化實(shí)驗(yàn)。篩選了10種大孔吸附樹脂，確定采用SP850型大孔吸附樹脂對(duì)粗提液中的活性成分進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附解析實(shí)驗(yàn)，產(chǎn)物中龍膽苦苷、馬錢苷酸和獐牙菜苦苷的含量分別為51.73％、2.52％、0.89％，總含量為55.14％。
　　4.采用反相制備液相色譜對(duì)其進(jìn)行制備，實(shí)驗(yàn)條件為:流動(dòng)相為甲醇∶0.1