脂肪酶固定化新方法研究及其應(yīng)用.pdf

1、本文以有機(jī)相中酶法拆分消旋烯丙醇酮為模型反應(yīng)，以制備高活性、高穩(wěn)定性和高選擇性的固定化酶為目標(biāo)，從固定化載體材料以及固定化方法兩個方面研究固定億過程對酶催化性能的影響規(guī)律及作用機(jī)制，研究新型的脂肪酶固定化方法。主要內(nèi)容如下：
　　 開發(fā)了以核苷酸鋯納米顆粒作為載體固定化節(jié)桿菌脂肪酶(ASL)的方法，考察了固定化時間、緩沖液pH值和濃度以及酶量等因素對固定化酶在有機(jī)相中催化性能的影響。結(jié)果表明當(dāng)催化烯丙醇酮的轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)時，一元尿苷

2、酸鋯是較佳載體(粒徑30-50nm)。固定化酶的活力回收率可達(dá)680％，對映體選擇率（E=200）比游離酶(E=86)有較大提高。以其作為載體制備獲得固定化酶的操作穩(wěn)定性得到顯著提高，重復(fù)利用20批次后殘余活力為58.7%，而游離酶僅為4%。
　　 考察了假絲酵母脂肪酶(CRL)在不同載體表面吸附過程和制備獲得的固定化酶的催化活力。結(jié)果顯示對于Zr(AMP)2-CRL、Zr(GMP)2-CRL和Zr(CMP)2-CRL，催化水解

3、反應(yīng)的效率分別為游離酶的20、15和11倍。在固定化過程中加入了磷脂，使得固定化酶在極性溶液中有很好的分散性，并且在有機(jī)相催化活力、熱穩(wěn)定性、重復(fù)利用性等方面均比游離酶有顯著改善。
　　 開發(fā)了以磁性多孔微粒作為載體固定化脂肪酶的方法，進(jìn)行了載體物理化學(xué)性質(zhì)測定與分析，考察了固定化時間、酶量和緩沖液pH值等因素對固定化酶在有機(jī)相中催化性能的影響。結(jié)果表明，制備的磁性微粒是以Fe3O4為磁核，呈現(xiàn)多孔，固定化酶的活力回收率可達(dá)24