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文檔簡介
1、由于固定化酶優(yōu)異的性能,固定化酶廣泛應用于食品,環(huán)境,分析化學,醫(yī)藥以及生物技術等許多領域。固定化酶具有更好的穩(wěn)定性,容易從反應介質中分離出來,可實現(xiàn)多次重復使用。 本研究涉及三方面的內容:一是新型甲殼胺顆粒的制備及在固定化酶方面的應用;二是建立一種新的固定化酶方法,即在多孔材料中捕捉交聯(lián)酶微晶;三新型膠體顆粒的制備及用于酶的固定化。 甲殼胺顆粒的制備及在固定化酶方面的應用:以乙酸水溶液為熔劑配制甲殼胺溶液,向該溶液中加
2、入可溶性鹽類得到乳狀混合液,然后用NaOH調至堿性,即得甲殼胺顆粒。所得甲殼胺顆粒大小分布在微米級,并表現(xiàn)出多空性。為增強甲殼胺顆粒的機械強度,防止甲殼胺顆粒在酸性溶液中溶解,并提供固定化酶所需的活性反應基團,用雙官能團試劑戊二醛對甲殼胺顆粒交聯(lián)處理。戊二醛處理后的甲殼胺顆粒作為載體用于固定化酪氨酸酶研究,發(fā)現(xiàn)所得的固定化酶具有高的蛋白載量(80mg/g載體)和高的酶活力(350單位/g載體)。 在多孔材料中捕捉交聯(lián)酶微晶:捕捉
3、交聯(lián)酶微晶過程分為三步:第一步是把多孔氧化硅浸入酪氨酸酶溶液,使酶溶液充滿多孔材料;第二步是使充滿酶溶液的多孔材料與沉淀劑溶液接觸,使酶分子在材料的孔道中形成晶體;第三步用戊二醛進行處理,使孔道中的酶晶體交聯(lián)形成不溶晶體。所得固定化酶具有高的蛋白載量(420mg/g載體)和高的酶活力(超過1600單位/g載體)。固定化酶具有高的熱穩(wěn)定性,抗有機熔劑及尿素穩(wěn)定性,以及機械穩(wěn)定性。 新型膠體顆粒的制備及用于酶的固定化:在聚乙烯醇存在
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