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1、聚乙二醇.聚乳酸兩親性嵌段共聚物(PEG-b-PLA),在水中易形成膠束,且在人體內(nèi)具有良好的生物相容性、無毒性、生物可降解性、體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)性等,因此PEG-b-PLA膠束在醫(yī)學(xué)診斷,體內(nèi)藥物緩釋及藥物靶向運(yùn)輸方面具有廣闊的應(yīng)用前景。為了提高對(duì)細(xì)胞的靶向作用,我們合成了PEG一端具有氨基,可修飾靶向分子的功能化端氨基聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物(H2N-PEG-b-PLA),旨在進(jìn)一步研究其在磁共振成像(MRI)造影劑二乙二胺五乙酸釓(Gd
2、-DTPA),脂溶性藥物載體及靶向運(yùn)輸方面的應(yīng)用。本文主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
1采用陰離子開環(huán)聚合法,以六甲基二硅基胺基烷鉀(KHMDS)作為引發(fā)劑,順序加入環(huán)氧乙烷(EO),D,L-丙交酯(D,L-LA)進(jìn)行開環(huán)聚合,酸解去除氨基保護(hù)基團(tuán)后成功得到了一系列端氨基聚乙二醇.聚乳酸嵌段共聚物(H2N-PEG-b-PLA)。反應(yīng)是可控聚合,可以通過調(diào)節(jié)投料比合成具有不同分子量和組成的聚合物。用GPC、FTIR與1H NMR表
3、征了嵌段共聚物的結(jié)構(gòu)。
2利用H2N-PEG-b-PLA端氨基引發(fā)Nζ-芐氧羰基賴氨酸酸酐(Lys(z)-NCA)開環(huán)聚合,得到了新型的聚賴氨酸-聚乙二醇-聚乳酸三嵌段共聚物(PLL-b-PEG-b-PLA)。該共聚物與二乙二胺五乙酸酐(DTPA)反應(yīng)得到PLL(DTPA)-b-PEG-b-PLA,采用溶劑透析法法制備了膠束,然后與GdC13水溶液混合,制備了表面螯合有Gd3+離子的聚合物膠束。GPC,F(xiàn)TIR與1H NM
4、R表征了聚合物的分子量和組成,表明合成了該三嵌段共聚物;采用熒光探針法測(cè)定的聚合物的臨界膠束濃度(CMC)為3.18x10-4 g/L:透射電鏡(TEM)觀察膠束大小均勻,具有規(guī)則的球形核-殼結(jié)構(gòu);動(dòng)態(tài)激光散射法(DLS)測(cè)定膠束平均粒徑在120 nm左右。細(xì)胞毒性,血漿實(shí)驗(yàn)和MRI馳豫率測(cè)試表明,螯合有Gd3+聚合物膠束對(duì)細(xì)胞沒有毒性,可以在體內(nèi)至少穩(wěn)定存在4h,膠束rl值與小分子Gd-DTPA相比提高了約5倍。
3界面
5、沉積法制備了H2N-PEG-b-PLA膠束和負(fù)載噻唑烷酮藥物(CDBT)的聚合物膠束,TEM與DLS對(duì)膠束進(jìn)行了表征,結(jié)果表明其具有規(guī)則的球形核-殼結(jié)構(gòu),大小均勻,平均粒徑在120nm左右,且分布較窄。紫外吸收光譜測(cè)定最大包封率為84.5%。倒置相差熒光顯微鏡觀察表明FITC標(biāo)記的聚合物膠束可以被細(xì)胞吞噬。藥物緩釋實(shí)驗(yàn)表明載藥聚合物膠束21天時(shí)釋放到90%,具有很好的藥物緩釋作用。采用SRB方法測(cè)定了空白膠束與載藥膠束的細(xì)胞毒性,實(shí)驗(yàn)表
6、面聚合物是生物安全的,載藥膠束具有較高的細(xì)胞毒性,表明具有很好的緩釋作用。
4 H2N-PEG-b-PLA與葉酸(Folate)和4-甲氧基苯甲酰胺(AA)分子分別反應(yīng)制備了具有靶向作用的FOL-PEG-b-PLA與AA-PEG-b-PLA。FTIR與1H NMR表征了聚合物的結(jié)構(gòu)。并且以FITC-PEG-b-PLA,F(xiàn)OL-PEG-b-PLA與AA-PEG-b-PLA按一定比例混合的混合物作為載體,制備了包覆有磁性Fe3
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