蘇云金芽孢桿菌NU-1、NU-2毒力提高與保護(hù)的研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)研究了蘇云金桿菌NU-1、NU-2毒力的提高與保護(hù).研究了NU-1、NU-2的菌種培養(yǎng)、種子培養(yǎng),篩選了適宜的培養(yǎng)條件;出于工業(yè)化生產(chǎn)的目的,利用正交方法優(yōu)化篩選了發(fā)酵培養(yǎng)基,并測(cè)定了晶體蛋白含量.結(jié)論為:菌種培養(yǎng)72 h,采用1號(hào)種子培養(yǎng)基,4％接種量,種子培養(yǎng)7h,NU-1在2號(hào)、10號(hào)發(fā)酵培養(yǎng)基上,NU-2在4號(hào)發(fā)酵培養(yǎng)基上發(fā)酵結(jié)果最高.NU-1在2號(hào)培養(yǎng)基上發(fā)酵40h,菌數(shù)達(dá)85.5×10<'8>個(gè)/ml,pH8.2,晶體

2、蛋白含量為6.320mg/ml,在10號(hào)培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況與其相似;NU-2在4號(hào)培養(yǎng)基上發(fā)酵42h,菌數(shù)達(dá)到78.0×10<'8>個(gè)/ml,pH8.1,晶體蛋白含量為6.085mg/ml.為了進(jìn)一步研究NU-1、NU-2的生長(zhǎng)情況,還測(cè)定了其生長(zhǎng)和pH曲線.篩選出兩種添加劑,試驗(yàn)了它們對(duì)Bt發(fā)酵的影響.結(jié)果表明:添加劑1號(hào)和添加劑2號(hào)都能提高Bt的發(fā)酵菌數(shù)并縮短發(fā)酵時(shí)間.采用不同防腐劑處理Bt制劑,研究了防腐劑的防腐效果.試驗(yàn)結(jié)果表明

3、防腐劑1號(hào),2號(hào)都是良好的防腐劑,防腐劑1號(hào)用量0.15%,防腐劑2號(hào)用量0.04%就可取得理想的防腐效果.用SDS-PAGE、酶活測(cè)定、電鏡觀察等方法研究了紫外線照射對(duì)Bt的破壞,并初步探尋了保護(hù)方法.結(jié)果表明:紫外線照射能破壞晶體蛋白的表面結(jié)構(gòu)和形態(tài),照射24h后,酶活性幾乎全部喪失,SDS-PAGE顯示晶體蛋白幾乎完全不溶.添加0.5%莧菜紅做保護(hù)劑,再經(jīng)紫外線照射后,酶活降低較小,電泳顯示伴孢晶體堿溶產(chǎn)生的135KD和65KD原