應用紅外光譜法區(qū)分常見食源性致病菌的研究.pdf

1、食源性致病菌可以經過肉類、蔬菜、水產品、乳制品等引起細菌性食品中毒，是危害人類健康、威脅公共安全的重要病原體。因此及時發(fā)現食品中的污染病原菌十分重要，如今，食源性致病菌的檢測與鑒定已經成為食品衛(wèi)生行業(yè)不可或缺的關鍵環(huán)節(jié)。
　　 有關食源性致病菌的檢測方法有很多，傳統(tǒng)的檢測鑒定方法是根據菌落的形態(tài)及其生理生化反應來判斷的，但是該方法通常耗時耗力，涉及的實驗較多，需要比較繁瑣的過程和復雜的操作，而且對于一些表觀特征相似的病原菌難以實

2、現準確識別。利用分子生物學、免疫學和遺傳學方法鑒別微生物的技術雖然具有較高的特異性、敏感性和準確性，但是此類技術操作復雜，需要專業(yè)人員，而且儀器和試劑費用較高，難以在常規(guī)實驗室中實現廣泛應用。
　　 本研究主要是采集了不同的食源性致病菌菌體細胞以及培養(yǎng)液上清的紅外光譜，通過對譜圖進行處理、比較，提取譜圖信息運用統(tǒng)計學方法和化學計量學的方法對數據進行處理分析，以期建立一種快速檢測食源性致病菌的新型方法。
　　 本研究論文主

3、要結果如下：
　　 1、大腸桿菌O157：H7、腸炎沙門氏菌、單核增生性李斯特菌、金黃色葡萄球菌四株菌菌體細胞400-4000cm-1范圍內紅外光譜的吸收峰主要由菌體細胞中蛋白質、脂類、糖類、核酸等大分子中的-OH、-CH3、CH2、C=O、N-H、C-N、C=O、P-O的伸縮、彎曲和環(huán)振動而產生。
　　 2、確定大腸桿菌O157：H7、腸炎沙門氏菌、單核增生性李斯特菌、金黃色葡萄球菌四株菌菌體細胞的光譜指紋區(qū)為1500

4、-800cm-1。
　　 3、對四株菌食源性致病菌光譜指紋區(qū)(1500-800cm-1)進行一階導數運算，提取數據進行皮爾森相關系數分析、主成分分析和聚類分析，三種分析方法都可以將這四株菌進行很好的區(qū)分。
　　 4、四株食源性致病菌分別在30℃、37℃兩種不同的培養(yǎng)溫度和BHI、LB、NB、TSB四種不同的培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下，平行光譜指紋區(qū)重復性好。而且不同的培養(yǎng)條件沒有對細胞的化學結構產生顯著影響，紅外光譜指紋區(qū)穩(wěn)定。<

5、br>　　 5、應用紅外光譜法在不同培養(yǎng)條件下四株食源性致病菌的區(qū)分效果不同，但是沒有呈現出規(guī)律性。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在紅外光譜圖上表現出了明顯的不同，紅外光譜在區(qū)分不同的革蘭氏陰性菌(大腸桿菌O157：H7、腸炎沙門氏菌)的能力要弱于區(qū)分不同的革蘭氏陽性菌(單核增生性李斯特菌、金黃色葡萄球菌)。
　　 6、為了進一步研究紅外光譜指紋技術應用于食源性致病菌檢測的范圍，采集10株單增李斯特菌菌體細胞的紅外光譜，選取150

6、0-800cm-1光譜一階導數數據，計算它們之間的光譜距離D值和進行聚類分析，結果表明應用紅外光譜技術在一定程度上可以表現出菌株的血清分型特征，在血清型水平上相近的菌株，其指區(qū)的紅外光譜相似程度更高。
　　 7、應用光譜技術鑒定檢測食源性致病菌，為了達到簡化實驗步驟、降低試驗成本、減少實驗時間的目的。本論文創(chuàng)新性的使用細菌培養(yǎng)液上清作為研究對象、應用主成分分析方法區(qū)分不同分類水平的病原菌。結果表明該方法可以區(qū)分大腸桿菌O157：